グアニル酸キナーゼの酵素活性測定

Creative Enzymesは、酵素活性解析に特化した高品質なバイオアナリティカルサービスおよびカスタム契約研究（CRO）を提供するリーディングカンパニーです。当社は、製薬、バイオテクノロジー、診断薬業界をはじめとする多数のお客様のニーズにお応えしてきました。最先端の分光光度計機器を完備し、Creative Enzymesは試験の性能を専門的かつ迅速に保証します。ここでは、グアニル酸キナーゼの迅速かつ高精度な活性アッセイをご提供します。

グアニル酸キナーゼ（EC 2.7.4.8；ATP:(d)GMPホスホトランスフェラーゼ）は、GMPおよびdGMPの可逆的リン酸化を触媒し、それぞれGDPおよびdGDPへ変換します。グアニル酸キナーゼはGMPからGDPへの変換に必須であり、ひいてはGTP合成に不可欠です。本酵素はcGMPのリサイクルにも関与し、この活性は、cGMP、GMP、GDP、GTPなどのシグナル伝達経路構成要素へのグアノシンヌクレオチド供給を調節すると考えられています。ヌクレオチド代謝に関与する重要酵素として、グアニル酸キナーゼは抗腫瘍薬の標的となります。また、本酵素は強力な抗腫瘍薬である6-チオグアニンによっても阻害されます。さらに、グアニル酸キナーゼはウイルス感染細胞における潜在的な抗ウイルス活性とも関連しています。例えば、ヘルペスウイルス由来チミジンキナーゼによる初回リン酸化の後、グアノシン類似体であるアシクロビルおよびガンシクロビルの活性化はグアニル酸キナーゼによって進行します。

グアニル酸キナーゼが抗ウイルス薬および抗腫瘍薬の活性化において中心的役割を担うことから、本酵素活性をモニタリングできることは極めて重要です。活性測定は困難な場合がありますが、新規治療薬設計に資する重要な知見をもたらします。幸いにも、Creative Enzymesはグアニル酸キナーゼに対する最も正確な酵素活性アッセイを提供できる体制を整えています。Creative Enzymesは最新技術、専門知識、最先端設備を有しており、お客様の研究を強力に支援します。具体的には、乳酸脱水素酵素（LDH）—ピルビン酸キナーゼ（PK）連結法によりグアニル酸キナーゼ活性を測定します。本法では、ホスホエノールピルビン酸、ピルビン酸キナーゼ、乳酸脱水素酵素、およびNADHを非制限濃度で存在させ、生成物形成をNADHの酸化に連結して定量します。340 nmにおける吸光度低下を分光光度法によりモニタリングします。

酵素学分野における長年の知見の蓄積により、Creative Enzymesは酵素アッセイ提供の世界的リーダーとして確固たる地位を築いてきました。当社は、お客様とプロセス全体を通じて協働し、高度な課題の解決や運用の最適化を支援します。酵素は技術的特性が高いため、メソッド開発においてはお客様との緊密な連携が重要です。これまでの取り組みにより、Creative Enzymesには数多くの継続的なお客様が集まっており、近い将来、貴社ともご一緒できることを期待しております。

図：GMPと複合体を形成したオリゴマー型E. coliグアニル酸キナーゼの結晶構造。
PDB：2ANB