疎水性相互作用クロマトグラフィーによる酵素精製

クリエイティブエンザイムズは、酵素分離の包括的な理解と実践的な経験に基づいて、効率的な精製方法を構築しています。私たちは、発現後のさらなる応用におけるニーズを満たすための一連の分離および精製方法を提供します。各サンプルの特定の状況に応じて、クリエイティブエンザイムズは、各ケースに最も適した精製方法を選択し、時には開発します。疎水性相互作用クロマトグラフィー（HIC）は、酵素精製で最も広く使用されている方法の一つです。クリエイティブエンザイムズの高品質なHICに関する専門知識は、あなたの研究の要求をサポートします。

疎水性相互作用は、生物学的システムにおいて非常に重要です。これらは、タンパク質の折りたたみと構造の安定化において支配的な力であり、抗体-抗原反応や酵素-基質認識などの他の生物学的プロセスでも重要な役割を果たします。HICは、固定化された疎水性リガンドとタンパク質の表面上の非極性領域との間の疎水性相互作用に基づいて、タンパク質の疎水性を利用してその分離を促進します。HICは、実験室規模だけでなく、工業規模の酵素精製においても確立された強力な分離技術です。HIC精製プロセスでは、高塩バッファーが酵素分子の疎水性領域を露出させ、その後、疎水性領域が基材に吸着されます。分子内の疎水性基が多いほど、結合を促進するために必要な塩は少なくなります。

HICと逆相クロマトグラフィー（RPC）は、密接に関連したLC技術です。しかし、実際には異なります。RPCの吸着剤は、HICの吸着剤よりも疎水性リガンドでより高く置換されています。タンパク質がRPC吸着剤に結合するのは通常非常に強力であり、そのため、エリューションには非極性溶媒の使用が必要です。RPCは、主にペプチドや水性有機溶媒中で安定な低分子量タンパク質の分析および調製分離に広く応用されています。RPCと比較して、HICの完全なシステムの極性は、固定相のリガンド密度が減少し、移動相に塩を加えることによって増加します。

特定のアプリケーションのためのクロマトグラフィー過程で成功を収めるためには、HICメディアを選択し、分離プロセスを最適化する際に主要なパラメータを考慮する必要があります：

• リガンドの種類と置換度
• 基材の種類
• 塩の種類と濃度
• pH
• 温度
• 添加物

クリエイティブエンザイムズは、さまざまな酵素の精製にHICを適用し、広範な経験を蓄積しています。私たちは、ターゲット酵素と精製環境の特性を慎重に検討し、適切な固定相と流体移動相を選択します。HICは効率的な分離技術と見なされているため、他のアプローチと組み合わせることができ、順序を無視できます。クリエイティブエンザイムズは、特定の要求に基づいて、分離および精製サービスの一部として、組み合わせた精製プロセスを提供します。私たちのサービスは、業界最高の品質で保証されています。技術相談やサービスの見積もりについては、お気軽にお問い合わせください。

図1: 水溶液中の(A)タンパク質と、HIC吸着剤上の疎水性リガンドとの間の疎水性相互作用を示す概略図。

図2: HICを使用したタンパク質混合物の勾配エリューションを示す概略図。図では、塩濃度が線形に減少（高塩から低塩へ）し、これにより不純物とターゲット酵素の両方がエリューションされます。