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トランスフェラーゼの酵素活性測定

トランスフェラーゼは、分子間で官能基の転移を触媒する重要な酵素群であり、代謝から生合成に至るまで幅広い生物学的プロセスを推進します。トランスフェラーゼの正確な活性測定は、その役割の理解、産業応用の最適化、酵素工学の発展に不可欠です。Creative Enzymesは、信頼性が高く、精密かつカスタマイズされたトランスフェラーゼ用酵素活性測定サービスを提供し、研究および応用プロジェクトの両方を支援する高品質なデータと専門的な知見をお届けします。

なぜトランスフェラーゼの酵素活性測定が重要なのか

トランスフェラーゼは、アミノ基、リン酸基、メチル基、グリコシル基、アシル基などの官能基を一つの基質から別の基質へ転移させる役割を担っています。これらの酵素は、エネルギー代謝、シグナル伝達、タンパク質修飾、薬物代謝などの生化学経路に不可欠です。その機能はしばしば高い特異性を持つため、トランスフェラーゼの活性測定には、基質の慎重な選択、最適化されたアッセイ条件、厳密なデータ解析が求められます。

トランスフェラーゼ活性測定の応用例:

  • 創薬および薬理学的研究
  • 酵素工学および指向性進化
  • 化学・製薬産業向けバイオカタリシス
  • 代謝経路工学および合成生物学

包括的なサービス内容

サービスの流れ

Step Procedure Details
1 Enzyme Preparation
  • 酵素サンプルは一貫した活性を確保するために慎重に精製されます。
  • 天然および組換えトランスフェラーゼの両方に対応します。
2 Substrate Selection
  • 適切なドナーおよびアクセプター基質の特定と検証。
  • 天然での関連性、安定性、特異性を考慮。
3 Assay Development
  • クライアントの関心酵素に合わせたカスタマイズアッセイを開発。
  • 複数のアッセイフォーマットに対応:
    • 吸光度ベースのモニタリング用分光光度法アッセイ
    • 高感度・高スループットの蛍光アッセイ
    • (該当する場合)グループ転移の精密追跡用放射性同位体アッセイ
4 Enzyme Activity Determination
  • グループ転移反応のリアルタイムモニタリング
  • 再現性を保証するための厳格なコントロール
5 Data Analysis & Reporting
  • 包括的な速度論および活性データ
  • 酵素効率、基質特異性、機構的知見を強調した専門的な結果解釈

トランスフェラーゼ活性測定の専門サービスを探す

研究や産業応用へのより的確なサポートのため、Creative Enzymesはトランスフェラーゼファミリー内で特化したサービスを提供しています。各サービスは、最適化されたアッセイシステムとカスタマイズされたワークフローにより、トランスフェラーゼの各サブクラスの独自の活性を捉えるよう設計されています。

Structure of Saccharomyces cerevisiae RNA polymerase II
リン転移酵素の酵素活性測定
キナーゼやホスホトランスフェラーゼを含むリン転移酵素は、エネルギー代謝やシグナル伝達の中心的役割を担います。当社のサービスでは、分光光度法や蛍光法などの高感度アッセイを用いて、リン酸基転移を正確に定量します。これらの測定は、酵素速度論、基質特異性、制御機構の理解を深め、創薬、代謝工学、合成生物学への応用を支援します。
Structure of human adenine phosphoribosyltransferase (APRTase) dimer in complex with phosphoribosyl pyrophosphate, adenine and ribose 5-phosphate
グリコシル・ヘキソシル・ペントシルトランスフェラーゼの酵素活性測定
このサービスは、糖基転移を触媒する酵素に特化しており、グリコシル化、多糖生合成、炭水化物代謝に不可欠です。トランスフェラーゼ活性を精密に測定するカスタマイズアッセイを開発し、酵素効率、糖ドナー特異性、反応速度に関する重要な情報を明らかにします。これらの結果は、製薬研究、産業バイオカタリシス、グリコバイオロジー研究に有用です。

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Creative Enzymesを選ぶ理由

幅広い専門知識

トランスフェラーゼ生物学と酵素速度論に関する深い知識

最先端テクノロジー

高度な検出プラットフォームを活用し、信頼性と高感度な結果を実現

オーダーメイドのソリューション

多様な研究・産業ニーズに応じたカスタマイズアッセイとワークフロー

高品質なデータ

厳格なプロトコル、品質管理、再現性を保証

機密性と信頼性

クライアントの知的財産およびプロジェクトデータを強力に保護

迅速な納品

効率的なプロジェクト管理で迅速な成果を実現

事例紹介と実際の応用例

事例1:Myxococcus xanthus由来polyP:AMPホスホトランスフェラーゼの触媒活性プロファイル

Myxococcus xanthusは飢餓時にポリリン酸(polyP)を産生し、ポリリン酸キナーゼ(Ppk)が子実体形成を促進します。本研究では、polyP:AMPホスホトランスフェラーゼ(Pap、クラスII Ppk2酵素)を特徴づけました。Pap活性はMn2+/Mg2+によって増強され、長鎖polyPに高い親和性を示しましたが、polyP60–70で最大の触媒効率を示しました。興味深いことに、PapはAMPからADPおよびATPを連続的に生成し、polyP:ADPホスホトランスフェラーゼ活性も明らかになりました。飢餓によりPap活性は2.3~2.4倍に増加し、組換えPapはPpk1またはアデニレートキナーゼ(AdkA)と協調してAMP、ADP、polyPからATPを産生しました。これらの知見は、栄養制限下でのエネルギー再生におけるPapの重要な役割を示しています。

Enzyme activity of polyphosphate kinase under different reaction conditions図1. 反応条件がPap活性に与える影響。(A–C)pH(A)、温度(B)、金属イオン(C)がPapによるADP合成に与える影響。これらの反応はMaterials and methodsに記載の方法で実施。データはpH8.0(A)、50℃(B)、5 mM Mn2+存在下(C)でのPap活性を100%とした相対値で示す。(D)Papの基質特異性。(Kimura and Kamatani, 2021)

事例2:YM155はNleBおよびSseKアルギニン・グリコシルトランスフェラーゼ活性を阻害

III型分泌系エフェクターNleBおよびSseKは、タンパク質基質のアルギニン残基を修飾するグリコシルトランスフェラーゼです。42,498化合物のハイスループットスクリーニングにより、YM155(セパントロニウムブロミド)がE. coli NleB1、Citrobacter rodentium NleB、Salmonella enterica SseK1/2の阻害剤として同定されました。YM155は哺乳類細胞への毒性や宿主O-結合型N-アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼとの交差反応性を示しませんでした。細胞アッセイでは、YM155は細胞内でのSalmonellaの生存率を低下させましたが、細菌の増殖には影響しませんでした。これは、NleB/SseK依存性グリコシル化の研究や選択的抗ビルレンス剤としての可能性を示しています。

NleB1 inhibitor screening図2. 一次スクリーニング結果。(A)NleB1阻害アッセイ全プレートのZ'スコア分布。平均Z'スコアは0.77 +/− 0.08。(B)ハイスループットスクリーニング(HTS)結果。(Zhu et al., 2021)

よくあるご質問

  • Q: どの種類のトランスフェラーゼの測定が可能ですか?

    A: グリコシルトランスフェラーゼ、キナーゼ、メチルトランスフェラーゼ、アシルトランスフェラーゼ、アミノトランスフェラーゼなど、すべてのサブクラスのトランスフェラーゼに対応しています。
  • Q: 活性測定にはどのようなアッセイフォーマットを提供していますか?

    A: 酵素の種類やプロジェクト要件に応じて、分光光度法、蛍光法、電気化学法、放射性同位体アッセイを使用します。
  • Q: 粗抽出物での活性測定は可能ですか?精製が必要ですか?

    A: どちらも対応可能です。精密な測定には精製を推奨しますが、ご要望に応じて粗抽出物や部分精製酵素にも対応したアッセイ設計が可能です。
  • Q: 一般的なプロジェクトの所要期間はどれくらいですか?

    A: 多くのトランスフェラーゼ活性測定プロジェクトは、アッセイの複雑さや酵素の種類により異なりますが、通常2~4週間で完了します。
  • Q: 活性測定に加えて速度論解析(Km、Vmaxなど)も提供していますか?

    A: はい。Km、Vmax、ターンオーバー数、阻害試験など、完全な速度論プロファイリングもご要望に応じて提供します。
  • Q: 他の酵素種の活性測定サービスもありますか?

    A: はい。トランスフェラーゼ以外にも、オキシドレダクターゼ、ヒドロラーゼ、リアーゼ、イソメラーゼ、リガーゼなど、主要な酵素クラス全てに対する包括的な活性測定サービスを提供しています。

参考文献:

  1. Kimura Y, Kamatani S. Catalytic activity profile of polyP:AMP phosphotransferase from Myxococcus xanthus. Journal of Bioscience and Bioengineering. 2021;131(2):147-152. doi:10.1016/j.jbiosc.2020.09.016
  2. Zhu C, El Qaidi S, McDonald P, Roy A, Hardwidge PR. Ym155 inhibits NleB and SseK arginine glycosyltransferase activity. Pathogens. 2021;10(2):253. doi:10.3390/pathogens10020253

研究および産業用途にのみご使用ください。個人医療用途には適していません。一部の食品グレード製品は、食品および関連用途における処方開発に適しています。

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