E. coli 酵素発現システム

クリエイティブエンザイムズは、複数のシステムでの組換え酵素の発現のためのカスタマイズサービスを提供し、最適化している産業バイオテクノロジー企業です。私たちはさまざまなホストシステムをテストし、長年の実践を通じて豊富な経験を得てきました。さまざまな発現ホストの知識により、各酵素に特有のケース別発現が可能になり、発現ベクターとホスト株は、最高の収量を許容可能なコストレベルで達成するために、私たちの多様なコレクションから選択されます。必要に応じて、発現構築物にはさまざまな精製タグも利用可能です。クリエイティブエンザイムズは、最も先進的な運営施設を備えており、専門チームは下流処理と精製をフォローアップすることができます。

大腸菌は、組換え酵素の生産に最も一般的に使用される生物であり、実験室での調査や商業活動の初期開発の両方に役立ちます。なぜなら、培養が簡単で迅速かつ安価だからです。さらに、そのベクターシステムは十分に開発されています。したがって、E. coli発現システムが産業および製薬のタンパク質生産においてすべてのシステムの中で最大のシェアを占めるのは驚くべきことではありません。支配的な細菌発現システムとして、さまざまな発現プラットフォーム間の比較のための有用なベンチマークとしても機能します。E. coli発現システムは、酵素工学や高スループット構造解析の努力の基盤です。このシステムは、非糖鎖化タンパク質の機能的発現にも重要な役割を果たします。このシステムを使用する他の利点は、E. coliのゲノムを迅速かつ正確に修正できること、プロモーター制御が難しくないこと、プラスミドのコピー数を容易に変更できることです。さらに、E. coliシステムは、代謝炭素フローの変化、アミノ酸類似体の取り込みの回避、細胞内ジスルフィド結合の構成、コンピュータ制御による再現性のある性能においても重要な役割を果たします。E. coliは、組換えタンパク質を乾燥重量の最大80％まで蓄積でき、さまざまな環境条件に耐えることができるため、大量生産に理想的です。

しかし、E. coliシステムにはいくつかの欠点もあります。例えば、酢酸の形成により、高細胞密度は細胞毒性を引き起こす可能性があります。この状態は、酸素レベルを制御することで回避できます。さらに、包接体として生成されるタンパク質はしばしば不活性で不溶性であり、再折りたたみが必要です。さらに、このシステムで生成される多くのジスルフィド結合を持つタンパク質は、再折りたたみが非常に困難です。同様に、E. coliシステムは通常、糖鎖化されていないタンパク質の生産に制限されます。さらに、E. coliで生成された組換え酵素の治療用途における欠点は、リポ多糖（LPS）、すなわち内因性毒素の蓄積であり、これは人間や他の哺乳類において発熱性です。この用途のためのタンパク質は、内因性毒素フリーになるために、第二段階で精製する必要があります。

したがって、E. coliシステムのこれらの欠点を克服するために、クリエイティブエンザイムズは、異なるプロモーターの使用、異なるホスト株の使用、シャペロンやフォルダースの共発現、温度の低下、タンパク質のペリプラズミックスペースまたは培地への分泌など、プロセスを改善するための複数の方法を開発しました。さらに、酢酸の生成と細胞毒性の問題は、グルコースを指数関数的に供給し、酢酸生成を引き起こす成長速度を下回るように特定の成長率を維持することで解決できます。ほとんどのサービスリクエストに対して、私たちは低コストで堅牢な発酵条件のために、最初の試みとしてE. coliシステムを推奨します。一般的に、E. coli発現サービスは、クリエイティブエンザイムズが研究者や企業が組換え酵素を成功裏に生産するのを助けるための顧客志向のソリューションを提供します。全体として、クリエイティブエンザイムズは、顧客に迅速かつ効率的な酵素発現と生産を提供し、特定の興味のあるユニークな酵素を生産するための完全なテーラーメイドサービスを提供できます。