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ランダム変異誘発およびDNAシャッフルのための上流サービス

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クリエイティブ酵素 包括的な提供 上流サービスのための ランダム変異誘発とDNAシャッフル高品質なミュータントライブラリを生成し、下流のスクリーニングと特性評価における成功を確実にするための基本的な基盤を提供します。これらの上流プロセスは、酵素の多様化と指向進化の基盤となる、正確で検証済み、発現準備が整ったDNAテンプレートを提供するように設計されています。

から テンプレート検証および遺伝子合成 へ ベクトルの構築とクローン作成クリエイティブエンザイムズは、先進的な分子生物学技術と厳格な品質管理基準を組み合わせています。当社の上流サービスは、すべてのランダム変異導入またはDNAシャッフル実験が正確で高い整合性を持つ遺伝物質から始まることを保証し、変異効率を最大化し、下流の変動を最小限に抑えます。

豊富な経験を持つ 酵素工学私たちの上流ワークフローは、学術および産業の酵素開発プロジェクトのために、信頼性が高く再現可能でカスタマイズ可能なソリューションを保証します。

上流サービス：変異原性のための強固な基盤を築く

ランダム変異誘発とDNAシャッフル は、配列の多様性を探求し、改良された酵素変異体を発見するための強力な戦略です。特定のアミノ酸変化を導入するサイト特異的変異導入とは異なり、ランダム変異導入は全遺伝子配列にわたる広範な変異を生成し、広大な機能的景観をサンプリングすることを可能にします。一方、DNAシャッフリングは、複数の親遺伝子から有益な変異を再結合し、強化されたまたは新しい機能を持つハイブリッド酵素を生成します。

これらの方法は強力ですが、その成功は出発DNA材料の品質と完全性に大きく依存します。シーケンシングが不十分なテンプレート、最適でないコドン使用、または非効率的なクローニング戦略は、変異導入効率、ライブラリの多様性、そして下流のスクリーニング結果に大きな影響を与える可能性があります。

これらの課題を認識し、Creative Enzymesは提供します ランダム変異誘発およびDNAシャッフルのための上流サービス プロジェクトのセットアップを効率化し、ボトルネックを排除し、すべての実験が高品質で検証済みのDNA構築体から始まることを保証します。テンプレートの準備から最適な発現システムへのクローン化まで、各上流パラメータを管理することで、あなたの変異導入実験が意義のある高品質な結果をもたらすことを確実にします。

Upstream services for random mutagenesis and DNA shuffling

提供するもの：ランダム変異誘発のための上流サービス

Creative Enzymesは、ランダム変異導入およびDNAシャッフルのワークフローに特化した統合された上流サービスのスイートを提供しています。各サービスは、エラーの発生しやすいPCR、DNA再組換え、またはハイスループットスクリーニングなどの下流アプリケーションとの精度、信頼性、互換性を提供するように設計されています。

サービス 仕様 価格
ランダム変異導入およびDNAシャッフルのためのテンプレートDNAシーケンシング 変異導入や組換え実験を行う前に、正確で完全な配列検証が不可欠です。当社のテンプレートDNAシーケンシングサービスは、クライアントが提供したまたは合成されたテンプレートの包括的な検証を行い、配列の完全性を確認し、不要な変異を除外します。遺伝子のサイズやプロジェクトの複雑さに応じて、サンガー法または次世代シーケンシング（NGS）を使用し、ライブラリ生成に進む前に100％の配列カバレッジと信頼性を確保します。 問い合わせ
ランダム変異導入およびDNAシャッフルのための遺伝子合成 私たちの遺伝子合成サービスは、最適化された変異準備遺伝子を構築するための完全にカスタマイズ可能なプラットフォームを提供します。高度な合成技術を使用して、正確な配列設計、コドン最適化、およびベクター対応の納品を行います。合成された各遺伝子は、完全な精度とその後のランダム変異誘発、DNAシャッフル、または発現アプリケーションへの適合性を確保するために厳格な品質管理を受けます。
ランダム変異導入およびDNAシャッフルのための発現ベクターへのクローニング 私たちのクローン作成サービスは、ターゲット遺伝子や合成配列を、選択した宿主システムに最適化された発現ベクターに挿入するプロセスを効率化します。細菌、酵母、昆虫、または哺乳類の発現が必要な場合でも、正しい向き、リーディングフレームの整合性、および配列の検証を保証します。このサービスは、後続の多様化およびスクリーニング段階に理想的な発現準備完了の構築物を提供します。

これらの上流サービスは、効率的で再現可能な酵素進化の基盤を築き、すべての実験的反復が検証された十分に準備されたDNA基盤から始まることを保証します。

サービスワークフロー

Workflow of upstream services for random mutagenesis and DNA shuffling

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私たちの特長的な利点

包括的な上流統合

シーケンシングからクローン作成までのエンドツーエンドソリューションにより、プロジェクトは精度と一貫性を持って始まります。

高忠実度遺伝子調製

各構造は厳格な品質管理を受けており、変異誘発効率を損なう可能性のあるエラーを排除しています。

カスタマイズ可能で柔軟なサービス

私たちの上流ワークフローは、あなたの特定の変異誘発目標、遺伝子タイプ、および発現システムに適応します。

専門的な分子生物学サポート

私たちの経験豊富な分子生物学者と酵素学者のチームは、設計と実行の過程で指導を提供します。

迅速な対応と信頼性

最適化されたワークフローと検証されたプロトコルは、品質を犠牲にすることなくリードタイムを最小限に抑えます。

機密性とデータセキュリティ

すべてのクライアントデータ、シーケンス、および結果は、厳格な機密保持契約の下で保護されています。

ケーススタディと成功事例

ケース1：高スループットランダム変異導入キャンペーンのテンプレート検証

クライアントのニーズ：

製薬会社は、溶媒耐性が向上した変異体を特定するために、加水分解酵素遺伝子に対して大規模なランダム突然変異キャンペーンを計画しました。しかし、クライアントの初期DNAテンプレートは、一貫性のない配列決定結果と潜在的なフレームシフトエラーを示しており、下流のライブラリー生成の信頼性に脅威を与えていました。

私たちのアプローチ：

複数のプラスミドクローンに対してフルレングスのサンガーシーケンシングを実施し、アミノ酸欠失を引き起こすコーディング領域内の点変異を特定しました。コドン最適化を施した修正された遺伝子配列が新たに合成されました。 大腸菌 検証されたテンプレートは、その後、クライアントのベクターシステムに再導入され、エラーが発生しやすいPCR変異導入のために使用されました。

結果：

修正され検証されたテンプレートは、ライブラリ構築の精度を向上させ、下流のシーケンシング拒否を95%以上削減しました。クライアントは、後に有機溶媒での活性が向上した変異体を特定するために、堅牢な酵素変異体ライブラリを成功裏に生成しました。

ケース2：酵素アイソフォームのDNAシャッフルのためのカスタム遺伝子合成とクローニング

クライアントのニーズ：

ある産業バイオテクノロジー企業は、DNAシャッフルを通じて3つの酵素アイソフォームを再結合し、熱安定性の向上したハイブリッドを作成しようとしました。しかし、自然な遺伝子配列は異なるGC含量と複数の内部制限部位を持っていたため、再結合とクローニングが非効率的でした。

私たちのアプローチ：

我々は、GC含量を調和させ、コドン使用を標準化し、効率的なDNAシャッフルを促進するために同源領域を戦略的に挿入した三つのアイソフォーム遺伝子を再設計し、合成しました。遺伝子は共通のプロモーターシステムの下で単一の発現ベクターにクローニングされ、配列確認により正確性が確認されました。

結果：

修正されたテンプレートは、非常に効率的なDNAシャッフルとその後の発現スクリーニングを可能にしました。クライアントは、12°C高い熱安定性と1.8倍の活性保持の改善を持つハイブリッド酵素を特定し、合理的な上流遺伝子準備の重要性を検証しました。

ケース3：ランダム変異体のハイスループットスクリーニングのためのベクトル最適化

クライアントのニーズ：

学術研究チームは、フラビン依存性酸化酵素の数千のランダム変異体をスクリーニングするための発現準備が整った構築物を必要としていました。彼らの既存のベクターシステムは低い発現と不十分な溶解性をもたらし、変異体スクリーニングのスループットを妨げていました。

私たちのアプローチ：

ターゲット遺伝子を、異なるプロモーターと溶解性向上タグを備えた複数の代替ベクターにクローニングしました。小規模な発現テストの後、T7プロモーターとN末端ヒスチジンタグを組み合わせた最適なベクターシステムが、大規模な突然変異導入およびライブラリスクリーニングのために選択されました。

結果：

最適化されたベクターは、タンパク質の溶解度を3.5倍向上させ、発現収量を増加させ、10,000以上の変異体の高スループットスクリーニングを成功させました。研究チームは、酸化安定性が大幅に向上したいくつかの変異体を特定し、その後、査読付きジャーナルに発表しました。

よくある質問：ランダム変異誘発のための上流サービス

  • Q: シーケンシングやクローン作成にどのようなタイプのテンプレートを受け付けていますか？

    A: プラスミドDNAとPCR産物の両方を受け付けています。最良の結果を得るために、高純度のプラスミドテンプレート（A260/A280が1.8から2.0の間）と完全な配列情報を推奨します。

  • Q: 短い遺伝子と長い遺伝子の合成の両方に対応できますか？

    A: はい。当社の遺伝子合成プラットフォームは、短いペプチドから大きなマルチキロベースの酵素までの配列をサポートしています。各構築物は、納品前に完全に配列確認されています。

  • Q: クローン作成にサポートされている発現系は何ですか？

    A: 我々は、互換性のあるベクターへのクローン作成を提供しています。 大腸菌酵母、昆虫、哺乳類のシステム。クライアントが提供するカスタムベクターもサポートされています。

  • Q: クローンの精度をどのように検証しますか？

    A: 各クローン構造はサンガーシーケンシングと制限酵素消化によって確認されます。必要に応じて、オプションの発現テストを含めることができます。

  • Q: 異なる宿主での発現のためのコドン最適化を手伝っていただけますか？

    A: もちろんです。私たちは、翻訳効率とタンパク質発現レベルを向上させるために、ホスト特異的なコドン最適化を提供しています。

  • 上流サービスのターンアラウンドタイムはどのくらいですか？

    A: 一般的なタイムラインは、シーケンシングが1〜2週間、遺伝子合成が2〜3週間、クローニングが1〜2週間です。統合されたワークフローを通じて、組み合わせたサービスは効率的に完了します。

  • Q: 各サービスに対するドキュメントは提供していますか？

    A: はい。クライアントには、配列検証報告書、プラスミドマップ、クロマトグラム、QCサマリーを含む完全な文書が提供されます。

  • Q: 機密性は保証されていますか？

    A: はい。すべてのシーケンス、結果、およびプロジェクトデータは、拘束力のある秘密保持契約の下で厳密に機密扱いとなります。クライアントは完全な知的財産権を保持します。
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オンラインお問い合わせ

研究および産業用途にのみご使用ください。個人医療用途には適していません。一部の食品グレード製品は、食品および関連用途における処方開発に適しています。

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