サービス

プロフェッショナルでコスト削減のソリューション

酵素学的アッセイ

Creative Enzymesは、酵素アッセイ市場の大部分を支援する、著名なサービスプロバイダーです。Creative Enzymesは、あらゆる種類の酵素学的アッセイの高度化に注力しています。最高精度での個別試験の実施に加え、テーマ別プロジェクトに対するソリューションとして、サービス一式の設計から完遂までを一貫して提供可能です。

当社の酵素学的アッセイサービス概要

酵素学的アッセイは、酵素の活性、反応速度論(キネティクス)、および基質特異性を測定するために設計された専門的な実験室試験です。これらのアッセイは、酵素の機能、阻害剤または活性化剤に対する応答、ならびに異なる生理学的条件または工業的条件下での挙動を理解するうえで基盤となります。反応速度および生成物形成を定量化することで、酵素学的アッセイは、医薬品開発、バイオプロセス最適化、診断試験の開発、ならびにバイオ医薬品等の品質管理に不可欠なデータを提供します。

当社の専門性は、ハイスループットスクリーニングから詳細な作用機序解析まで、多様なアッセイフォーマットを網羅しており、正確で再現性の高い結果を保証します。研究用途、規制当局提出資料(レギュラトリーサブミッション)、またはプロセスバリデーションのいずれにおいても、当社の酵素学サービスは、プロジェクトに求められる精度と明確性を提供します。

包括的な酵素学的アッセイサービスラインアップ

標準的な活性測定から複雑な作用機序解析まで、酵素学的アッセイサービスを包括的に提供します。

サービス 特長 価格
活性測定 キナーゼ、ホスファターゼ、プロテイナーゼ、脱アセチル化酵素、ペプチダーゼ、エステラーゼ等に対応したアッセイ。キットベースおよびカスタムアッセイに対応。1アッセイあたり200候補からのハイスループットスクリーニングが可能。 1アッセイあたり$1,500~
お見積り依頼
分析法開発 前例のない条件や新規発見酵素に対する新規アッセイ設計。可逆反応やカップルドアッセイを含む、難易度の高いアッセイに関する専門性。
酵素反応速度論(キネティクス) 主要な酵素パラメータ(VmaxKdKmkcatk1k-1)を高精度に決定。
酵素触媒機構解析 結晶構造解析、部位特異的変異導入、レポーター基標識、速度論的同位体効果測定等を用いた包括的な機構解析。

酵素学的アッセイのワークフロー(ステップ別)

Enzymology assays workflow

当社チームへお問い合わせ

酵素学的アッセイでCreative Enzymesが選ばれる理由

専門的な解析・評価

データ創出における比類ない精度。

充実した設備・プラットフォーム

あらゆるスケールに対応するアッセイ機器を完備。

ハイスループット対応

1アッセイあたり200候補から対応可能。

微量化アッセイ

最小限のサンプル量で高感度を実現。

迅速なターンアラウンド

正確な結果を迅速に提供。

ワンストップソリューション

アッセイ開発からデータ解析・報告まで一貫対応。

酵素学的アッセイの事例・成功事例

事例1:創薬プログラムにおける酵素活性のハイスループットスクリーニング

目的

炎症性疾患に関与する新規セリンプロテアーゼに対する強力な阻害剤の同定を目的として、製薬企業のクライアントよりCreative Enzymesに依頼がありました。生理学的に妥当な条件下で、500を超える低分子候補の阻害活性を評価するハイスループット酵素学的アッセイの開発および実施が目標でした。

結果

  • アッセイ開発
    消光型蛍光レポーターで標識した合成ペプチド基質を用い、蛍光測定によるプロテアーゼ活性アッセイを設計。
    酵素の安定性および活性を最大化するため、アッセイバッファー組成、pH、補因子濃度を最適化。
    ハイスループット運用時のシグナル飽和を回避するため、時間および基質濃度に対するアッセイ直線性を確認。
  • ハイスループットスクリーニング
    自動分注システムを用い、384ウェルマイクロプレートフォーマットでアッセイを実装。
    ベースライン活性および阻害のコントロールを含め、520化合物候補を48時間以内に重複測定で処理。
    Z'ファクター0.82を達成し、アッセイの堅牢性および再現性を確認。
  • ヒット同定
    10 μMにおいて70%超の阻害を示す化合物を12件同定。
    上位4候補を選定し、追試としてIC50算出および酵素反応速度論的特性評価(Ki:ナノモルレンジ)を実施。

結論・考察

本プロジェクトにより、標的プロテアーゼに対する強力な阻害剤を検出可能な、検証済みのハイスループットスクリーニングプラットフォームを提供しました。迅速なターンアラウンドにより、クライアントは有望候補を予定より前倒しで前臨床評価へ移行できました。本件は、アッセイ開発、自動化、ならびに速度論解析を統合し、効率的な探索パイプラインとして実装できる当社の能力を示すものです。

事例2:新規産業用バイオ触媒に対するカスタム速度論解析

目的

バイオディーゼル製造を目的として新規に改変されたリパーゼについて、産業バイオテクノロジー企業より包括的な速度論プロファイルの作成依頼がありました。スケールアップ判断の指針とするため、溶媒および温度条件の範囲にわたり、VmaxKmkcat、および触媒効率を決定することが目的でした。

結果

  • アッセイ設計
    発色基質としてp-ニトロフェニルパルミテート(pNPP)を用いた吸光光度法アッセイを開発。
    工業的反応環境を模擬するため、水系/有機溶媒混合系に適用できるようアッセイを最適化。
  • 速度論測定
    基質濃度0.1~5 mMの範囲で反応を実施。
    非線形回帰によりミカエリス・メンテン式およびラインウィーバー・バークプロットへフィッティングし、パラメータを算出。
    37°C・水系バッファー条件にて、Vmax = 185 ± 4 μmol·min-1·mg-1Km = 0.42 ± 0.03 mM、kcat = 152 s-1を測定。
    10%(v/v)エタノール存在下45°Cで最適活性を示し、6時間後も活性の90%超を維持することを確認。
  • 安定性および溶媒耐性
    50°Cで2時間インキュベーション後も活性の80%超を保持。
    メタノール30%まで、顕著な活性低下なく耐性を示した。

結論・考察

速度論および安定性データにより、本改変リパーゼが半有機条件下でのバイオディーゼル製造に適していることが確認されました。これらの結果により、クライアントはパイロットスケール試験へ自信をもって移行でき、研究開発上の不確実性を低減するとともに、商用化までのタイムライン短縮に寄与しました。本件は、標準的な酵素学的アッセイにとどまらず、産業プロセス要件に整合したテーラーメイドのプロトコルを提供できる当社の能力を示しています。

酵素学的アッセイに関するFAQ

  • Q:酵素アッセイに「既存」のプロトコルを使用できますか?

    A:酵素はそれぞれ最適活性を示す条件が異なる一方、ハイスループットスクリーニングでは単一の反応条件が用いられることが一般的です。その結果、観察される酵素活性の差は当該条件下に限定されたものであり、定量的比較にそのまま適用できない場合があります。さらに、研究者を悩ませる課題として、生成物形成の検出や基質消費の測定が、反応マトリクス中の他成分(不活性溶質や他の酵素等)により強く干渉を受けることが挙げられます。このような場合、正確な測定のためにはS/N比(シグナル/ノイズ比)を考慮する必要があります。検出法および測定パラメータを適切に選定することで、多くの場合これらの問題は解決可能です。
  • Q:特殊または難易度の高い酵素アッセイにも対応できますか?

    A:もちろん可能です。当社は、前例のない条件や新規発見酵素に対するアッセイ開発を得意としています。可逆反応からカップルドアッセイまで、先進的な分析法開発と幅広い検出技術を活用し、最も複雑なプロジェクトにも対応します。
  • Q:結果はどの程度の期間で得られますか?

    A:最適化されたワークフローとハイスループットプラットフォームにより、品質を損なうことなく迅速なターンアラウンドを実現しています。プロジェクトの範囲にもよりますが、標準的な活性アッセイであれば最短で数日以内に結果をご提供可能です。複雑な速度論解析または機構解析では追加の時間を要する場合がありますが、事前に明確なスケジュールをご提示します。
  • Q:貴社のハイスループットスクリーニングは他社と何が違いますか?

    A:当社のハイスループットシステムは、1アッセイあたり200候補から対応可能で、微量化フォーマットによりサンプル消費量を低減しつつ感度を向上させます。さらに、精密な品質管理と組み合わせることで、意思決定に直結する信頼性・再現性の高いデータを創出します。
  • Q:特定の研究目的に合わせてアッセイをカスタマイズできますか?

    A:はい。標準的なキットベースアッセイ、改変プロトコル、または完全カスタム法のいずれであっても、要件に合わせてプロジェクトごとに最適化します。ワンストップサービスモデルにより、初期コンセプトから完全なデータパッケージまで、シームレスにご提供します。
  • Q:データの正確性と信頼性はどのように担保していますか?

    A:サンプル調製からデータ報告まで、全工程で厳格な品質管理を適用します。専門的なアッセイプラットフォーム、熟練した解析、ならびに統計学的バリデーションを統合することで、正確性と再現性を兼ね備えた結果を保証します。
  • Q:結果納品後のサポートはありますか?

    A:もちろんです。データ送付で終わることなく、結果の解釈、トラブルシューティング、ならびに研究または製品開発における次のステップ策定を支援するためのプロジェクト後コンサルテーションも提供しています。

研究および産業用途にのみご使用ください。個人医療用途には適していません。一部の食品グレード製品は、食品および関連用途における処方開発に適しています。

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