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小分子との酵素結合

酵素は、さまざまな目的のために小分子と結合されることがよくあります。産業用酵素開発を例にとると、酵素表面の電荷を中和または反転させるために、小分子との酵素結合が適用されます。修飾の効果は、小分子の性質、修飾の程度、および使用される酵素に基づいています。熱安定性が通常の目的です。たとえば、過酸化ホースラディッシュ酵素(HRP)を無水物で修飾すると、熱安定性が向上しました。さらに、酵素は異なる長さのリンカーを導入するために使用され、その後、免疫測定用の酵素結合体が調製されます。HRPは、酵素結合免疫吸着測定法(ELISA)で最も一般的に使用される酵素の1つです。製薬業界では、小分子を酵素に結合させることが、医療診断や薬物送達システムの開発にも寄与する可能性があります。

小分子との結合は、通常、ターゲット酵素のアミノ酸残基にいくつかの化学基を酵素触媒によって共有結合的に追加する形で発生します。この酵素の修飾は、i) 補因子の付加および ii) メチル、アセチル、硫酸塩、リン酸塩などの小さな機能基の付加として分類できます。さまざまな種類の反応が使用される場合があります。たとえば、補因子の付加には、バイオチン化、ホスホパンテテイン化、リポ酸の付加、テトラピロール/ヘムのリガンド化が含まれます。小さな機能基の付加には、メチル化、N-アセチル化、リン酸化、硫酸化、ヒドロキシル化が含まれます。

Creative Enzymesは、この分野のリーディングカンパニーです。私たちは、特に小分子との酵素結合サービスを提供しています。化学的および酵素的戦略の両方を使用して、さまざまな顧客のニーズに応えています。指定された酵素対分子比での結合も実現可能です。最後に、精製および特性評価手順の流れを通じて、高純度で信頼性のある構造データを持つ酵素結合体を提供します。典型的な結合プロジェクトには、以下の主要なステップが含まれます:

  • 小分子とのカスタム酵素結合。
  • 酵素結合体の分離と精製。
  • さまざまな免疫測定用の精製、活性化、キット形式の修飾酵素(HRP、APなど)。
  • 酵素結合体の特性評価。

関連セクション

酵素工学と修飾

無水物などの小分子との酵素結合体。図1 酵素の一次アミンとの無水物の反応。
(Applied Microbiology and Biotechnology 2014)

References:

  1. Milczek, E.M. (2018) Commercial Applications for Enzyme-Mediated Protein Conjugation: New Developments in Enzymatic Processes to Deliver Functionalized Proteins on the Commercial Scale. Chemical Reviews. 118(1): 119-141.
  2. Minten, I.J., Abello, N., Schooneveld-Bergmans, M.E.F., Van Den Berg, M.A. (2014) Post-production modification of industrial enzymes. Applied Microbiology and Biotechnology. 98(14): 6215-6231.

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