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プロフェッショナルでコスト削減のソリューション

サイト指向変異導入のための上流サービス

クリエイティブ酵素 包括的な提供 上流サービスのための 標的指向変異導入法 (SDM) あなたの酵素工学プロジェクトが強固な基盤から始まるようにするために、これらの準備ステップは、下流の突然変異誘発および発現ワークフローの精度、再現性、成功にとって重要です。テンプレートDNAの完全性を確認することから、最適化された遺伝子を合成し、それらを適切な発現ベクターにクローンするまで、私たちの上流サービスはシームレスで信頼性の高いサポートを提供します。厳格な品質管理と深い技術的専門知識を持つ私たちは、あなたの突然変異誘発プロジェクトをコンセプトから実行までスムーズに進め、時間を節約し、エラーを最小限に抑え、研究の継続性を確保します。

サイト指向変異導入のための上流サービスの紹介

標的指向変異導入法 酵素工学を革命的に変え、タンパク質配列内のアミノ酸を正確に変更することで触媒特性を探求または向上させることを可能にしました。しかし、ミュータジェネシス実験の成功は、出発材料の質に依存しています。不正確なテンプレート配列、最適でない遺伝子設計、または非効率的なクローニング戦略は、結果を損なう可能性があり、貴重な資源を浪費することになります。

私たちの上流サービスは、検証済みの変異準備が整ったDNAテンプレート、カスタム設計の遺伝子構造、および効率的なクローン作成ソリューションを提供することで、これらの重要な課題に対処します。各ステップは、望ましい変異導入戦略および下流のアプリケーションとの互換性を確保するよう最適化されており、高い信頼性の酵素工学のための堅牢な分子基盤を築いています。

Step-by-step site-directed mutagenesis enzyme engineering services at Creative Enzymes

サイト指向変異導入上流サービス

クリエイティブエンザイムズは、サイト特異的変異導入に先立ち、またそれをサポートする統合された一連の上流サービスを提供しています。

Template DNA sequencing service for site-directed mutagenesis

サイト特異的変異導入のためのテンプレートDNAシーケンシング

正確なDNA配列情報は、成功した部位特異的変異導入の基礎です。私たちのシーケンシングサービスは、テンプレートの完全性を検証し、背景変異の不在を確認します。先進的なシーケンシングプラットフォームと綿密なデータ分析により、変異導入のステップが始まる前に配列の正確性を保証します。

Gene synthesis service for mutagenesis projects

部位特異的変異導入のための遺伝子合成

私たちの遺伝子合成サービスは、高い発現と変異操作に最適化されたカスタム設計のDNA配列を提供します。コドン最適化、配列検証、エラーフリー合成技術を使用して、あなたの興味のある酵素に合わせた変異準備が整った構造体をお届けします。

Vector cloning service for site-directed mutagenesis

サイト特異的変異導入のためのエクスプレッションベクターへのクローン化

効率的なタンパク質発現とその後の成功を確保するために、私たちはターゲット遺伝子を幅広い発現ベクターに正確にクローニングするサービスを提供しています。各コンストラクトは、正しい方向、リーディングフレーム、および完全性を確認するために検証され、変異導入実験に直接使用できる状態になります。

各サービスは、研究ニーズに応じて、個別に注文することも、フルプロジェクトワークフローの一部として注文することもできます。

サービスワークフロー

Workflow of upstream services for site-directed mutagenesis

私たちの技術的卓越性

  • 高忠実度シーケンシングとエラーのない合成技術。
  • 完全な文書化を伴う多層的な品質管理。
  • ホスト特有の最適化のための 大腸菌酵母、哺乳類システム。
  • クライアントのプロジェクト目標に合わせたカスタマイズ可能なワークフロー。
  • 厳格な機密保持プロトコルの下での完全なトレーサビリティとデータの整合性。
  • クリエイティブエンザイムズとのシームレスな統合 突然変異原性ダウンストリーム特性評価サービス

これらの能力が組み合わさることで、すべての上流準備が堅牢で再現可能であり、成功した酵素工学を推進する準備が整います。

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私たちのサービスを選ぶ理由

包括的な専門知識

私たちのチームは、分子生物学、酵素学、タンパク質工学に関する深い知識を組み合わせて、比類のない精度を提供します。

シームレスな統合

上流、突然変異誘発、及び下流サービスは、プロジェクトの円滑な進行のために完全に互換性があります。

厳格な品質管理

すべての構造は、信頼性を確保するために高度なシーケンシングと分析的検証を通じて確認されています。

柔軟なカスタマイズ

サービスは、プロジェクトの設計、ターゲット酵素、および希望する発現系に合わせてカスタマイズされています。

迅速な対応

効率化されたワークフローと最適化されたプロトコルは、品質を損なうことなくターンアラウンドタイムを最小限に抑えます。

データの透明性

各成果物には包括的な文書が添付されており、テンプレートから最終構造までの完全なトレーサビリティが確保されています。

ケーススタディ

ケース1:産業酵素における触媒効率の向上

クライアントのニーズ:

産業バイオテクノロジー企業は、大規模なバイオ触媒合成に使用される独自の加水分解酵素の熱安定性と触媒効率を向上させることを目指しました。既存の酵素は55°C以上での活性保持が限られており、その結果、プロセスの収率が低下し、運用コストが増加していました。

私たちのアプローチ:

私たちは、配列の忠実性を確認し、潜在的なバックグラウンド変異を排除するために、テンプレートDNA配列決定を用いてプロジェクトを開始しました。その後、発現を向上させるためにコドン最適化された遺伝子が設計され、合成されました。 大腸菌当社の耐熱性発現ベクターへのクローン作成サービスを使用して、構築物は温度制御発現に適した高コピー数プラスミドに統合されました。私たちの専門家は、計算による安定性予測に基づいて変異導入のための重要な残基を特定するために、クライアントと密接に協力しました。

結果:

エンジニアリングされた構造体は、触媒効率が2.5倍向上し、60°Cでの長時間のインキュベーション後も90%以上の活性を維持しました。クライアントは改良された酵素バリアントを使用して生産を成功裏にスケールアップし、プロセス時間を30%短縮し、酵素の投与量要件を大幅に削減しました。

ケース2:代謝酵素における活性部位の変異の研究

クライアントのニーズ:

大学の研究グループは、抗生物質の生合成に関与する代謝酵素の構造と機能の関係を調査することを目的としました。彼らは基質結合メカニズムと触媒ダイナミクスを明らかにするために、保存された残基における複数の部位特異的変異を必要としました。

私たちのアプローチ:

研究チームは、最初にテンプレートDNAシーケンシングを通じて検証したプラスミド配列を提供しました。最適な発現を確保するために、最適化された遺伝子変異体を合成し、共発現研究に適したベクターへの精密クローニングを行いました。各変異は、上流の検証に従って、標的指向変異導入法を用いて戦略的に導入されました。

結果:

すべての構造体は配列の逸脱なしに品質管理を通過し、再現可能な発現と精製を可能にしました。動力学的アッセイは、残基の置換に関連した明確な触媒の変化を明らかにし、酵素のメカニズムに関する洞察を記述した査読付きの出版物につながりました。このプロジェクトは、正確な上流の準備が酵素研究における正確な機能解釈を直接サポートすることを強調しました。

よくある質問

  • Q: 自分のプラスミドをシーケンシングテンプレートとして提出できますか?

    A: はい。クライアントが提供したプラスミドやPCR産物をシーケンシングテンプレートとして受け付けていますが、それらが私たちの純度と濃度の要件を満たす必要があります。また、変異導入に適したテンプレートであることを確認するために、初期の品質チェックも行います。
  • Q: 発現ホストのためにコドン最適化を行いますか?

    A: もちろんです。私たちはホスト特有のコドン最適化を提供しています。 大腸菌酵母、昆虫、哺乳類システム。コドン使用、GC含量、mRNAの安定性はすべて効率的な発現のために最適化されています。
  • Q: どのような発現ベクターをサポートしていますか?

    A: 私たちは、標準的な原核生物および真核生物のベクターの幅広い選択肢を維持しており、クライアントから提供されたカスタムベクターでも同様に快適に作業できます。私たちのクローン専門家が互換性を評価し、必要に応じて推奨を行います。
  • Q: 上流サービスのうちの1つだけを注文できますか?

    A: はい。各サービス—シーケンシング、合成、またはクローン作成—は独立して注文できます。ただし、統合されたワークフロー内でサービスを組み合わせることで、より良い一貫性と短い納期が確保されます。
  • 上流準備プロセスにはどのくらいの時間がかかりますか?

    A: 一般的な納期は2〜3週間で、遺伝子の長さ、複雑さ、ベクターの種類によって異なります。緊急のプロジェクトには、品質を損なうことなく迅速なオプションを提供しています。
  • Q: 各サービスにデータレポートを提供していますか?

    A: はい。すべてのプロジェクトには、配列クロマトグラム、ベクターマップ、クローニング検証結果、および完全なトレーサビリティのためのQC証明書を含む詳細な報告書が付随します。
  • Q: シーケンスの正確性と構造の整合性をどのように確保しますか?

    A: すべての配列は、プロセス中および最終的な配列確認の両方を使用して二重検証されます。クローニング産物は、納品前に制限酵素消化と分析的配列決定によって検証されます。
  • Q: プライマーや変異部位の設計を手伝ってくれますか?

    A: はい。私たちの専門家は、効率性、特異性、成功した突然変異の結果を確保するために、プライマー設計や突然変異計画を支援できます。
  • Q: あなたのデータ機密性および知的財産ポリシーは何ですか?

    A: すべてのクライアント情報および構成物は厳格な機密保持の下で取り扱われます。私たちは標準的なNDA保護のもとで運営しており、すべての知的財産権は完全にクライアントに帰属します。
  • Q: 成果物はどのように発送されますか?

    A: 我々は、完全な文書を添えて、凍結乾燥または液体の形態で精製されたプラスミドDNAを提供します。必要に応じて、サンプルは温度管理された条件下で発送されます。

参照文献:

  1. 張K、尹X、施K、 他者大きなDNA断片の増幅と組換えリガーションに基づく、大型プラスミドの標的変異導入のための高効率な方法。 サイエンティフィック・リポーツ2021年; 11(1): 10454. doi:10.1038/s41598-021-89884-z

研究および産業用途にのみご使用ください。個人医療用途には適していません。一部の食品グレード製品は、食品および関連用途における処方開発に適しています。

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