チミジンキナーゼの酵素活性測定

クリエイティブエンザイムズは、チミジンキナーゼの酵素活性を正確に測定するための最も先進的な分光光度法アッセイを提供しています。私たちは、特定の問題を解決するための全期間を通じて顧客と協力し、ターゲットプロセスを反映し、新しい方法を開発することができます。顧客との密接な協力は、私たちの企業の成功の基盤であり、多くの顧客が何年も私たちに忠実でいてくれています。

チミジンキナーゼ（EC 2.7.1.21; 以前はEC 2.7.1.75としてリストされていた; TKs）は、ピリミジン回収経路の開始に不可欠な酵素であり、ATPのγ-リン酸をチミジン（dThd）にマグネシウム依存的に転送する触媒として機能し、チミジン一リン酸（dTMP）を形成します。dTMPは、細胞内の酵素によってさらにリン酸化され、2'-デオキシチミジン三リン酸（dTTP）となり、複製中のDNAポリメラーゼの基質として機能します。したがって、チミジンキナーゼはdTTPプールを調節し、DNA生合成の重要な調節酵素です。哺乳類のチミジンキナーゼは、2つのアイソザイムに分けられます。TK1は細胞質内酵素であり、特異性が狭く、デオキシチミジンとデオキシウリジンのみをリン酸化し、厳密に細胞周期依存的です。TK1の活性は非分裂細胞では低いか存在せず、G1期後半の細胞で発生し始め、S期に増加し、DNA合成の増加と密接に相関し、分裂中に急速に消失します。この変動は、DNA複製のためのdTTPのバランスの取れた供給を提供するために重要です。TK2はミトコンドリア酵素であり、細胞周期に依存しません。

さらに、チミジンキナーゼはその配列と基質特異性に基づいて2つのサブグループに分類されます。タイプIチミジンキナーゼには、単純ヘルペスウイルスTK（HSV-TK）とミトコンドリアヒトTK2が含まれます。はるかに広く分布しているタイプIIチミジンキナーゼは、真核生物、細菌、牛痘、天疱瘡、ワクチニア、ポックスウイルス科などの多くのウイルスを含むほとんどの生物に見られます。これらのさまざまなウイルスは、治療介入の可能性のあるターゲットです。したがって、チミジンキナーゼは、抗ウイルスおよび抗癌化学療法に使用されるデオキシヌクレオシド前駆体の活性化において重要な役割を果たします。たとえば、タイプII TKが前駆体を活性化する能力は、HIV治療においてすでに文書化されています。

したがって、チミジンキナーゼの機能的意義をさらに追求するためには、チミジンキナーゼの活性を監視できることが重要です。クリエイティブエンザイムズは、チミジンキナーゼの信頼性の高い酵素アッセイの完全な能力を持っています。詳細については、チミジンキナーゼの活性は、ADPの生成がピルビン酸キナーゼ/乳酸脱水素酵素反応を介してNADHの生成に結びつけられ、340 nmで監視される連結分光光度法アッセイによって決定できます。クリエイティブエンザイムズの製品は、グローバル市場で最も信頼され、実証されており、顧客のニーズに応える高品質のデータを提供します。クリエイティブエンザイムズからの科学的ノウハウと技術サポートにより、あなたの製品は強力な市場での存在感を持つことができます。

図：ヒトチミジンキナーゼ1の結晶構造。
PDB：1XBT