ADP特異的グルコキナーゼの酵素活性測定

Creative Enzymesは、社内で開発された特定のカスタマイズ可能な活性アッセイで市場で際立っています。私たちは、特定の問題を解決し、プロセスを反映し、新しい酵素活性定量法を開発するために、プロセスを通じて顧客と協力しています。私たちの目標は、酵素アッセイのコストを下げ、すべての研究者がアクセスできるようにすることです。最終的に、高品質で低コストであることが、他の競合他社と私たちを区別します。ここでは、ADP特異的グルコキナーゼの信頼性の高い酵素アッセイを提供できることを誇りに思います。

ATPは、生物システムにおける自由エネルギーの貯蔵に多様な役割を果たします。さらに、ATPはキナーゼ反応におけるリン酸供与体としても機能します。ATP依存性ヘキソキナーゼは、ATPをリン酸供与体として使用してグルコースのリン酸化を触媒します。ヒト、酵母、Schistosoma mansoniなど、さまざまな生物から分離されたすべての既知のATP依存性ヘキソキナーゼは、高い関連性を持っています。ADP特異的グルコキナーゼは、ADPをリン酸供与体として使用してグルコースのリン酸化を触媒することが示されています。ADP特異的グルコキナーゼは、ホモ二量体（Pyrococcus furiosus）または単量体（Thermococcus litoralis）のタンパク質として構成され、ADPとグルコースに対して非常に特異的です。

ADP特異的キナーゼの存在は、生物システムに2つの主な利点をもたらします。一つは、ADPがATPよりも高い熱安定性を示すこと、特に二価カチオン（Mg²⁺、Ca²⁺、Zn²⁺など）の存在下でです。もう一つは、ADPを生成する同化反応がADP依存性キナーゼの基質を提供し、低エネルギー負荷条件下での糖の活性化を促進することです。高温好熱古細菌からのADP特異的グルコキナーゼとホスホフルクトキナーゼは相同であることが発見され、新しいキナーゼ群を形成しています。ADPを使用する他のキナーゼは現在まで知られていないため、この新しいキナーゼ群は、キナーゼの進化的起源を明らかにする非常に珍しいモデルです。したがって、これらの酵素は酵素進化の研究においてますます注目を集めています。

この酵素自体の特異性のため、ADP-特異的グルコキナーゼの活性アッセイは、工業規模で十分に確立されていません。しかし、分光光度法アッセイは、この酵素の活性定量に最も信頼性が高く、コスト効果の高い方法であることが示されています。幸運なことに、Creative Enzymesは、ADP特異的グルコキナーゼの酵素活性を正確に測定するための最も先進的な分光光度計を提供できる自信があります。例えば、ADP特異的グルコキナーゼは、NADPHの生成を測定する酵母グルコース-6-リン酸脱水素酵素との連結アッセイによって測定されます。このアッセイは50 °Cで実施されます。この温度では、酵母酵素は活性を保ち、ADP特異的グルコキナーゼはその活性を測定するのに十分に活性です。NADPHの吸光度は334 nmで追跡されます。

Creative Enzymesは、顧客向けのバイオ分析サービスと酵素アッセイの開発、最適化、供給において世界的なリーダーです。私たちの迅速なサービス、最高の顧客ケア、そして専念したアプローチにより、私たちは競合他社の中で最も好まれるベンダーとなりました。

図: ADP特異的グルコキナーゼのT. litoralisからの結晶構造。
PDB: 4B8R