血液型物質エンド-1,4-ベータ-ガラクトシダーゼの酵素活性測定

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血液型物質エンド-1,4-ベータ-ガラクトシダーゼ（EABase、EC 3.2.1.102）は、グリコシダーゼ加水分解酵素ファミリーGH98の最初に発見されたメンバーであり、A抗原とB抗原の両方に対するエンドグリコシダーゼ活性を示します。より具体的には、EABaseは、1,3-α-D-ガラクトシルまたはN-アセチルガラクトサミン残基、及び1,2-α-D-フコシル残基に隣接する1,4-ベータ-D-ガラクトシル結合の加水分解を触媒します。EABaseは、宿主細胞表面のグリカンからAおよびB抗原の全トリサッカライドを完全に除去し、抗原がない赤血球を残します。AOB群システムにおける主な抗原的違いは、赤血球表面の糖タンパク質および脂質に付着したトリサッカライド部分の一貫性です。A抗原のトリサッカライド（GalNAcα-1,3-(Fucα-1,2)-Galβ-）はN-アセチルガラクトサミンで終端されているのに対し、B抗原（Galα-1,3-(Fucα-1,2)-Galβ-）では末端の糖はガラクトースです。この末端の糖を欠くO型細胞のグリカンは、コアのα-Fuc-1,2-ß-Gal-構造を示し、ほとんどの個人に対して非抗原性です。AまたはB抗原の末端N-アセチルガラクトサミンまたはガラクトースを酵素的に除去してO型血を生成することは、赤血球をユニバーサルで抗原がないドナータイプに変換する手段として長い間提案されており、免疫応答研究において重要です。この酵素の活性測定は通常、蛍光測定アッセイによって行われます。クリエイティブエンザイムズは、酵素動態、基質特異性、変異酵素評価に関する研究を満たすEABaseの活性アッセイサービスを提供しています。

図：Streptococcus pneumoniaeからの血液型物質エンド-1,4-ベータ-ガラクトシダーゼの結晶構造。
参考文献：Kwan, D.H. et al. J. Am. Chem. Soc. 2015 137: 5695.

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