ホスホリパーゼDの酵素活性測定

Creative Enzymesは、学術および産業界のお客様のニーズに応えるべく、酵素活性解析における高品質なバイオアナリティカルサービスならびにカスタム受託研究（CRO）サービスを提供するリーディングカンパニーです。高品質かつ独自性の高いサービスに対する当社の情熱は、市場における卓越した評価によって裏付けられています。ここに、Creative EnzymesはホスホリパーゼDに対する信頼性の高い酵素アッセイを提供できることを誇りをもってご案内いたします。

ホスホリパーゼD（EC 3.1.4.4；PLD）は広く存在する酵素であり、リン脂質（PL）のホスホジエステル結合を加水分解してホスファチジン酸（PA）とアルコール部分を生成します。加水分解活性に加え、PLDはトランスホスファチジル化（transphosphatidylation）と呼ばれる反応により、リン脂質の極性頭部基の相互変換も触媒します。トランスホスファチジル化は、PC（ホスファチジルコリン）やレシチンなどの高存在量リン脂質から、ホスファチジルエタノールアミン（PE）、ホスファチジルセリン（PS）、ホスファチジルグリセロール（PG）といった天然で比較的存在量の少ないリン脂質を合成するうえで特に有用です。合成されたリン脂質は、乳化剤、化粧品成分、医薬製剤、ならびにリポソーム調製用途に使用できます。

図1：PLDが触媒する反応。加水分解（A）およびトランスホスファチジル化（B）。R₁およびR₂は脂肪酸残基のアルキル鎖を示し、X1およびX2は極性頭部基を表す。
参考文献：Damnjanović J, Iwasaki Y. Journal of Bioscience & Bioengineering, 2013, 116(3):271-280.

PLDは1940年代にニンジンおよびキャベツ葉で初めて発見されました。これまでに、PLDはウイルス、原核生物、ならびに真核生物（哺乳類、酵母、植物）に存在することが報告されています。PLDの大部分は、いわゆるPLDスーパーファミリーに属しており、同スーパーファミリーにはPLDのほか、カルジオリピン合成酵素（CLS）、ホスファチジルセリン合成酵素（PSS）、ポックスウイルス外被タンパク質、Yersinia由来マウス毒素（Ymt）、チロシルDNAホスホジエステラーゼ、ならびに複数のヌクレアーゼが含まれます。PLDスーパーファミリーの全メンバーは、保存性の高いHxKxxxxDモチーフ（xは任意のアミノ酸）を1つまたは2つ有しています。このHKDモチーフ、特にHis残基は触媒反応において極めて重要です。

機能面では、PLDは干ばつ耐性に関する遺伝資源（germplasm）スクリーニングのツールとして有用である可能性があります。また、PLDは抗がん活性を有するアルキルリン酸エステルであるオクタデシルホスホ-L-セリンの製造にも利用できます。さらに、PLDは小胞輸送、エンドサイトーシス、エキソサイトーシス、ならびに有糸分裂といった重要な細胞プロセスの調節因子としても機能します。PLD発現の異常は、多様ながんの進行に加え、パーキンソン病およびアルツハイマー病とも関連付けられています。したがって、これらの重要な利用により、PLD活性をモニタリングするニーズが高まっています。

Creative Enzymesは、PLDに対する最高精度の酵素活性アッセイを提供可能です。分光光度法によるアッセイは、本酵素の活性測定において信頼性が高く、かつ費用対効果に優れた手法として評価されています。当社の結果の品質は、最先端の分光光度計測機器により担保されています。総じて、Creative Enzymesは最高水準の顧客満足を提供することで定評のある、最適なパートナーです。

図2：Streptomyces antibioticus由来ホスホリパーゼDの結晶構造。
PDB：2ZE4