3’,5’-環状ヌクレオチドホスホジエステラーゼの酵素活性測定

Creative Enzymesは、酵素活性の定量に特化したサービスプロバイダーとして豊富な実績を有しています。競合他社に先駆けるべく、Creative Enzymesは、業界内でも他に類を見ない先進的な技術支援を伴う革新的な酵素アッセイサービスを提供しています。ここに、3’,5’-環状ヌクレオチドホスホジエステラーゼに対する高精度な酵素活性アッセイを提供できる体制を整えております。

セカンドメッセンジャーである環状AMP（cAMP）および環状GMP（cGMP）は、cAMP/cGMP依存性プロテインキナーゼ（PKAおよびPKG）、EPAC（cAMPにより活性化される交換因子）、GAFドメイン、ならびに環状ヌクレオチド作動性チャネル（CNGC）を制御することにより、細胞内シグナル伝達カスケードにおいて重要な役割を担います。3’,5’-環状ヌクレオチドホスホジエステラーゼ（EC 3.1.4.17；PDE）は、多遺伝子ファミリーを形成し、組織に広く分布しており、cAMPおよびcGMPをそれぞれ5’AMPおよび5’GMPへ加水分解することで、細胞内の環状ヌクレオチド濃度の一過性変動を制御します。PDEは、心筋収縮性、血小板凝集、脂肪分解、グリコーゲン分解、平滑筋収縮、イオンチャネル伝導性、アポトーシスなどの過程におけるcAMPおよびcGMPの細胞内レベルを調節します。

これまでに、11種類のPDEファミリー（PDE1～PDE11）が同定されており、21遺伝子から構成されます。各PDEファミリーのメンバーはアミノ酸配列に大きな多様性を示す一方で、基質特異性および阻害剤特異性、ならびに酵素活性の調節機構に基づき機能的に関連しています。PDE5、PDE6、PDE9はcGMPを基質とし、PDE4、PDE7、PDE8はcAMPに特異的であり、PDE1、PDE2、PDE3、PDE10、PDE11は両基質を分解します。これまでに同定された哺乳類PDEのアミノ酸配列には、活性部位を含み2つの金属イオンが結合する約270残基からなる高度に保存されたC末端領域が共通して存在します。PDEスーパーファミリーのメンバーは、組織分布および発現レベルにも顕著な差異があり、多様な疾患に対する治療標的として注目されています。各種PDEに対する特異的阻害剤を開発し、動物モデルにおいて生理機能を評価することで、この見かけ上の複雑性の生物学的意義を解明することは、医薬品研究開発上きわめて重要です。したがって、PDEは医療および診断研究において中核的な役割を果たすことが示されます。

Creative Enzymesは、酵素試験および手法最適化に関する長年の経験に基づき、PDEに対する高精度な酵素活性アッセイを提供できることを光栄に存じます。クロマトグラフィーを用いたアッセイは、当該酵素の活性定量において信頼性の高い手法であることが示されています。独自性と卓越性を備えた当社サービスは、Creative Enzymesを競合他社と明確に差別化し、PDEを含有する製品開発における最適なパートナーとしてご選択いただけます。

図：ヒトPDE2Aの構造をリボン表示で示す。
参考文献： Iffland A, Kohls D, Low S, et al. Biochemistry, 2005, 44(23): 8312-8325.