ヌクレオシド二リン酸キナーゼの酵素活性測定

Creative Enzymesは、分析サービスの開発、最適化、および提供を専門とする世界有数の企業です。グローバル市場において高い評価を得ているCreative Enzymesは、最先端の機器を用いて実施される革新的な酵素活性アッセイを提供しています。最高水準の技術サポートと個別対応のカスタマーサービスは、業界トップクラスです。ここに、ヌクレオシド二リン酸キナーゼの信頼性の高い酵素活性アッセイを自信をもってご提供いたします。

ヌクレオシド二リン酸キナーゼ（EC 2.7.4.6；ATP:ヌクレオシド二リン酸ホスホトランスフェラーゼ）ファミリーは、普遍的に存在するハウスキーピング型ホスホトランスフェラーゼからなる特定の酵素群です。これらは、基質特異性の低い反応としてヌクレオシド二リン酸（NDP）をヌクレオシド三リン酸（NTP）へ変換する触媒作用を担い、生合成に必要な細胞内NTPプールの維持に関与します。特にヌクレオシド二リン酸キナーゼは、ピンポン機構により、高エネルギーのリン酸化中間体として保存性の高いヒスチジン残基（His）を介し、NTPからNDPへ末端γ-リン酸基（P）を可逆的に転移します。ヌクレオシド二リン酸キナーゼは、原核生物、下等および高等真核生物、マウス、ラット、ヒトを含む多様な生物種および細胞型から単離されています。分布は広範で、特に核内、微小管に関連する細胞質、細胞表面、ミトコンドリア、ならびに細胞外液中に存在します。真核生物のヌクレオシド二リン酸キナーゼはホモ六量体である一方、細菌のヌクレオシド二リン酸キナーゼはホモ四量体です。

ヌクレオシド二リン酸キナーゼは多面的に重要な役割を担います。(1) ATPを供与体として、核酸合成に必要な非アデニル型NTPや、UDP-グルコースおよび一部のCDP-脂質誘導体を含む重要な代謝中間体の合成に寄与します。(2) クエン酸回路で産生されるGTPとADPの間のトランスホスホリル化反応を触媒します。(3) タンパク質合成、Gタンパク質シグナル伝達、およびチューブリン重合に必要なGTPを供給し得ます。さらに、ヌクレオシド二リン酸キナーゼは、増殖、発生、アポトーシス、分化の生物学的制御にも関与することが示されています。加えて、腫瘍における転移抑制、ヒスチジン依存性プロテインキナーゼ活性、ならびに3’–5’エキソヌクレアーゼ活性として機能し得ることも報告されています。一方で、腫瘍形成を促進し、正常な発生および細胞増殖においても多様な役割を果たします。このように、ヌクレオシド二リン酸キナーゼは、その多岐にわたる重要な機能により、ますます注目を集めています。

Creative Enzymesは、ヌクレオシド二リン酸キナーゼに対する最高精度の酵素アッセイを実施可能です。ヌクレオシド二リン酸キナーゼ活性は、カップリングアッセイにより分光光度法で測定します。キナーゼ反応によるATP生成をNADP⁺の還元に共役させ（またはADP生成をNADHの酸化に共役させ）、340 nmにおける吸光度変化をモニタリングして反応進行を追跡します。最先端の分光光度計、先進的な技術、ならびに卓越した専門家チームにより、当社は専門性と迅速性をもって結果の品質を保証します。最終的に、ヌクレオシド二リン酸キナーゼに関わるあらゆる研究において、Creative Enzymesは最適な選択肢です。

図：Dictyostelium discoideum由来ヌクレオシド二リン酸キナーゼの結晶構造。
PDB：1PAE