スペクトロフォトメトリックアッセイを用いた1,4-アルファ-グルカン分岐酵素の酵素活性測定

クリエイティブエンザイムズは、高品質のバイオ分析サービスと酵素活性分析に特化したカスタマイズ契約研究を提供するリーディングカンパニーです。私たちは、製薬、バイオテクノロジー、化学産業の多くのクライアントのニーズに応えています。最も先進的な分光光度計器を完備し、1,4-α-グルカン分岐酵素の信頼性の高い活性アッセイを専門的かつ迅速に提供できることを誇りに思っています。

1,4-α-グルカン分岐酵素は、α-アミラーゼファミリー13に属し、3つのドメインを含んでいます：鎖転送の長さを決定するのに関与するアミノ末端ドメイン、基質選好性と触媒能力に関与するカルボキシル末端ドメイン、そして中央の(α/β)バレル触媒ドメインです。1,4-α-グルカン分岐酵素（EC 2.4.1.18、1,4-α-D-グルカン:1,4-α-D-グルカン 6-α-D-(1,4-α-D-グルカノ)-トランスフェラーゼ）は、植物のデンプンや動物および細菌のグリコーゲンの構造を決定する上で重要な役割を果たし、グリコーゲン鎖の外側の非還元末端から同じまたは隣接する鎖のα-1,6位置にα-1,4結合のグルコースユニットを転送することで、グリコーゲンの分岐を作成します。デンプンとグリコーゲンはメガダルトンサイズのグルコースポリマーであり、古細菌、細菌、酵母から植物や動物を含む高等真核生物まで、ほとんどの生物において利用可能なエネルギーと炭素化合物の主要な貯蔵庫として機能します。グリコーゲン鎖の成長は、1,4-α-グルカン分岐酵素のような分岐酵素に依存しています。分岐反応は非還元末端の数を増加させ、グリコーゲンを合成および消化に対してより反応性にします。また、細胞内でのグリコーゲンの溶解性を確保するためにも不可欠です。肝臓のグリコーゲン供給は血糖の恒常性を維持するために重要であり、心筋および骨格筋のグリコーゲンは筋収縮の燃料として使用されます。細胞内に不溶性グリコーゲンが蓄積されることは、グリコーゲン蓄積病タイプIV（GSD IV）として知られ、1,4-α-グルカン分岐酵素の変異によって引き起こされます。GSD IVはその異なる形態で肝臓、筋組織、または中枢および末梢神経系に影響を与えます。したがって、1,4-α-グルカン分岐酵素がこの病気の治療において中心的な役割を果たしていると結論できます。この酵素は、食品成分や栄養補助食品の生産にも使用されることがあります。

クリエイティブエンザイムズは、1,4-α-グルカン分岐酵素の正確な活性アッセイを提供する能力を完全に備えています。この酵素の活性は、520nmでの可視光の吸光度の減少を分光光度法で測定することによって決定できますが、基質の溶解性やインキュベーション条件などの他の技術的な困難が活性アッセイを妨げる可能性があります。それにもかかわらず、クリエイティブエンザイムズは、すべての業界に対して最高の技術サポートとパーソナライズされた顧客サービスを提供することに取り組んでいます。

図： ヒトグリコーゲン分岐酵素（GBE1）の結晶構造。
PDB： 4BZY