分光光度法アッセイを用いた1,4-α-グルカン分岐酵素の酵素活性測定

Creative Enzymesは、酵素活性解析に特化した高品質なバイオアナリティカルサービスおよびカスタム契約研究（CRO）を提供するリーディングカンパニーです。当社は、製薬、バイオテクノロジー、化学業界の多数のお客様のニーズに対応しています。最新鋭の分光光度計を完備し、1,4-α-グルカン分岐酵素の信頼性の高い活性アッセイを、専門性と迅速性をもって提供できることを誇りとしています。

1,4-α-グルカン分岐酵素は、α-アミラーゼファミリー13に属し、3つのドメイン（鎖転移長の決定に関与するN末端ドメイン、基質選択性および触媒能に関与するC末端ドメイン、ならびに中心の（α/β）バレル型触媒ドメイン）から構成されます。1,4-α-グルカン分岐酵素（EC 2.4.1.18、1,4-α-D-グルカン：1,4-α-D-グルカン 6-α-D-(1,4-α-D-グルカノ)-トランスフェラーゼ）は、グリコーゲン鎖の外側の非還元末端からα-1,4結合したグルコース単位を同一または隣接する鎖のα-1,6位へ転移させ、グリコーゲン分岐を形成することにより、植物におけるデンプン構造および動物・細菌におけるグリコーゲン構造の決定に重要な役割を果たします。デンプンおよびグリコーゲンはメガダルトン級のグルコースポリマーであり、古細菌、細菌、酵母から、植物・動物を含む高等真核生物に至るまで、多くの生物において、即時利用可能なエネルギーおよび炭素化合物の主要な貯蔵庫として機能します。グリコーゲン鎖の伸長は、1,4-α-グルカン分岐酵素のような分岐酵素に依存します。分岐反応は非還元末端の数を増加させ、グリコーゲンを合成および分解に対してより反応性の高い状態にします。また、細胞内におけるグリコーゲンの可溶性を担保するうえでも不可欠です。肝臓のグリコーゲン貯蔵は血糖恒常性の維持に必須であり、心筋および骨格筋のグリコーゲンは筋収縮のエネルギー源として利用されます。細胞内に不溶性グリコーゲンが蓄積する状態はグリコーゲン貯蔵病IV型（GSD IV）として知られ、1,4-α-グルカン分岐酵素の変異により引き起こされます。GSD IVはその病型により、肝臓、筋組織、または中枢・末梢神経系に影響を及ぼします。したがって、1,4-α-グルカン分岐酵素が当該疾患の治療において中心的役割を担うことが示唆されます。本酵素は、食品原料および栄養補助食品の製造にも利用可能です。

Creative Enzymesは、1,4-α-グルカン分岐酵素の正確な活性アッセイを提供する体制を十分に備えています。本酵素の活性は、520 nmにおける可視光吸光度の低下を分光光度法により測定することで評価できますが、基質の溶解性やインキュベーション条件など、技術的課題がアッセイの妨げとなる場合があります。それでもなお、Creative Enzymesは、あらゆる業界のお客様に対し、最適な技術サポートと個別最適化されたカスタマーサービスの提供に注力しています。

図：ヒトグリコーゲン分岐酵素（GBE1）の結晶構造。
PDB：4BZY