クロマトグラフィーアッセイを用いたヌクレオシドデオキシリボシルトランスフェラーゼの酵素活性測定

Creative Enzymesは、酵素アッセイに特化した最も経験豊富なバイオテクノロジー企業です。最新の機器、最新技術、そして優れた専門家チームを備えたCreative Enzymesは、ヌクレオシドデオキシリボシルトランスフェラーゼを含むトランスフェラーゼ酵素の信頼性の高いアッセイを提供する準備が整っています。

ヌクレオシドデオキシリボシルトランスフェラーゼ（EC 2.4.2.6）は、2’-デオキシリボヌクレオシドのプリンまたはピリミジン塩基と自由なピリミジンまたはプリン塩基との間の交換を触媒します。これらの酵素は、同じプロセスを触媒するヌクレオシドホスホリラーゼの代替手段を提供します。これらの酵素は2’-デオキシリボヌクレオシドに特異的であり、高い位置選択性を持ち、β-アノマーが独占的に形成されるため立体選択的でもあります。ヌクレオシドデオキシリボシルトランスフェラーゼは、最初に乳酸菌に対して記述され、特定のStreptococcusの種や、Crithidia luciliae、Trypanosoma brucei、Borrelia burgdorferiのような寄生性単細胞真核生物にも見つかっています。

図1: ヌクレオシドデオキシリボシルトランスフェラーゼによって触媒される反応。E、酵素；B1およびB2、プリンまたはピリミジン。
参考文献: Fernándezlucas J, et al. Applied & Environmental Microbiology, 2010, 76(5):1462-70.

乳酸菌には2種類のヌクレオシドデオキシリボシルトランスフェラーゼが記述されています：タイプIはプリンデオキシリボシルトランスフェラーゼで、2’-デオキシリボースを2つのプリン間で移動させることに特異的です；タイプIIはヌクレオシド2’-デオキシリボシルトランスフェラーゼで、プリンまたはピリミジン間でデオキシリボースの移動を触媒します。両方の酵素は、共有結合デオキシリボキシル酵素中間体の形成によって、ピンポンバイバイメカニズムに従います。したがって、これらの酵素は2’-デオキシリボシルヌクレオシドの「ワンポット」合成を実行するために使用できます。このバイオトランスフォーメーションは、反応が非常に穏やかな条件下で行われ、環境に優しい化学技術を提供するため、有望なプロセスです。

クロマトグラフィーアッセイは、ヌクレオシドデオキシリボシルトランスフェラーゼの活性を測定するための最も信頼性の高い方法であることが示されました。Creative Enzymesは、酵素活性を正確に測定するための最も先進的なクロマトグラフィー技術を提供します。たとえば、デオキシアデノシンの生成は、254nmの吸光度で高性能液体クロマトグラフィーを使用して分析され、生成されたデオキシシチジンは逆相高性能液体クロマトグラフィーによって分離され、260nmの吸光度で測定されます。Creative Enzymesは、注文日から最短の期間で製品を提供することを約束します。迅速なサービス、最高の顧客ケア、そして専任のリソースにより、Creative Enzymesはすべてのクライアントにとって最も好まれるサプライヤーとなっています。

図2: Lactobacillus leichmanniiからのヌクレオシドデオキシリボシルトランスフェラーゼの結晶構造。
PDB: 1F8X