クロマトグラフィーアッセイを用いたヒアルロン酸合成酵素の酵素活性測定

長年にわたる探索および開発を通じて、Creative Enzymesは酵素活性アッセイ分野における世界的リーダーとして確固たる地位を築いてまいりました。Creative Enzymesは、自然を科学へと橋渡しする起業家精神と革新性を変わらず維持しながら、継続的に成長を続けています。酵素メーカーとして、Creative Enzymesは常にお客様の要件に適合し、次段階の開発を支援することで、満足度の高いサービスを提供する最適な選択肢となっております。注目サービスの一つとして、ヒアルロン酸合成酵素の正確な活性測定をご提供いたします。

ヒアルロン酸合成酵素（EC 2.4.1.212；HASs）は、ヒアルロン酸（HA）の生合成を担う膜結合型グリコシルトランスフェラーゼです。HASsは二機能性酵素であり、2つの異なる活性部位においてUDP-α-D-グルクロン酸およびUDP-α-N-アセチル-D-グルコサミンの双方に結合し、Mg²⁺またはMn²⁺存在下で交互に触媒反応を進行させ、2種類の異なるグリコシド結合の形成を触媒します。哺乳類では、HAは相同な3種類のHAS酵素（HAS1、HAS2、HAS3）により産生されます。これらの酵素はUDP-GlcNAcおよびUDP-GlcAに対して高い基質特異性を示し、類似酵素は多様な生物種においても見出されています。

HAは、N-アセチルグルコサミンβ(1,4)グルクロン酸β(1,3)の二糖反復単位から構成されるグリコサミノグリカンポリマーです。大量の水分を保持し、組織に高い粘性と弾性を付与します。HAは受精、胚形成、発生および分化の過程において重要な役割を担います。さらに、細胞遊走、貪食、プロテオグリカンのアセンブリなど、幅広い細胞機能および細胞挙動にも関与します。また、HAは組織リモデリング、正常な組織恒常性の維持において重要であるとともに、骨関節病変、炎症性疾患、血管疾患などの病態にも深く関与します。加えて、HAはドラッグデリバリー担体、化粧品原料、鎮痛用途としても利用可能です。HAの多面的機能を踏まえると、HASsはHA生合成に直接作用することから、あらゆる生物学的活性において重要な酵素です。

HASsは酵素学的に特性解析が進められている一方で、その構造および作用機序に関する報告は限られています。機序情報が限定的である理由の一つは、簡便な活性アッセイが不足している点にあります。ここで、Creative EnzymesはHASsに対する精密な活性アッセイを提供する体制を十分に備えています。HAS活性は、UDP-[¹⁴C]GlcAを用い、クロマトグラフィーによりモニタリングします。高分子量HAへのUDP-[¹⁴C]GlcAの取り込み量は、下降式ペーパークロマトグラフィーにより測定します。

当社研究センターは、最先端の設備、長年にわたる研究実績、卓越した専門家チームを擁し、活性測定の高い再現性と精度を保証いたします。ご発注日から最短期間で製品をお届けします。今後もCreative Enzymesは、専門性の高いサービスを通じてお客様の事業を継続的に支援してまいります。

図：ヒトヒアルロン酸合成酵素2の結晶構造。
UniProt： Q92819