スペクトロフォトメトリックアッセイを用いたプリンヌクレオシドホスホリラーゼの酵素活性測定

クリエイティブエンザイムズは、高品質のバイオ分析サービスを提供するリーディングカンパニーです。私たちは、世界中のクライアントのニーズに応じた酵素活性分析に特化した契約個別研究を提供しています。最も先進的な分光光度計器を完備し、すべてのアッセイは専門的かつ迅速に実施されます。ここに、プリンヌクレオシドホスホリラーゼの信頼できる活性アッセイを提供できることを誇りに思います。

プリンヌクレオシドホスホリラーゼ（EC 2.4.2.1; PNPase）は、プリンヌクレオシド（イノシンおよびグアノシン）とデオキシヌクレオシド（デオキシイノシンおよびデオキシグアノシン）をそれぞれのプリン塩基およびペントース1-リン酸に可逆的に変換する酵素です。プリンヌクレオシドホスホリラーゼは普遍的な酵素であり、サルベージ代謝経路において重要な役割を果たし、生細胞におけるDNAの適切な合成と分解に必要です。

プリンヌクレオシドホスホリラーゼは、トリメリックとヘキサメリックの2つのクラスにさらに分類できます。トリメリックプリンヌクレオシドホスホリラーゼは、哺乳類プリンヌクレオシドホスホリラーゼとも呼ばれ、6-オキソプリンヌクレオシドに特異的であり、高等生物と原核生物の両方に存在します。ヘキサメリックプリンヌクレオシドホスホリラーゼは低等生物にのみ見られ、6-アミノおよび6-オキソプリンヌクレオシドの両方を受け入れる広範な基質特異性を持っています。トリメリックとヘキサメリックプリンヌクレオシドホスホリラーゼの活性部位残基にはかなりの違いがありますが、メカニズムは類似していると考えられています。ヘキサメリックとトリメリックプリンヌクレオシドホスホリラーゼの基質特異性の違いは、抗癌自殺遺伝子治療の戦略を示唆しています。したがって、プリンヌクレオシドホスホリラーゼは癌治療に使用されることへの関心が高まっています。さらに、ヒトにおけるトリメリックプリンヌクレオシドホスホリラーゼの活性の欠如は、T細胞の異常な増殖の結果として選択的免疫不全を引き起こします。したがって、新しい選択的免疫抑制薬および抗癌剤の開発は、酵素阻害剤の発見から利益を得るでしょう。

プリンヌクレオシドホスホリラーゼの機能的重要性を調査するためには、プリンヌクレオシドホスホリラーゼの活性を監視できることが非常に重要です。その目的を達成するために、クリエイティブエンザイムズは、酵素の探求と方法の最適化に関する広範な経験に基づいて、プリンヌクレオシドホスホリラーゼのための正確な活性アッセイを提供しました。この酵素の活性は、尿酸の放出を分光光度法で測定することによって293nmで決定されます。

発見と開発の年を経て、クリエイティブエンザイムズは酵素活性測定サービスの世界的リーダーとして浮上しました。酵素応用への道に立ちはだかる課題にかかわらず、クリエイティブエンザイムズは常に次のステージの要件を満たし、あなたの最良のサービスプロバイダーとなるでしょう。

図： E. coliプリンヌクレオシドホスホリラーゼヘキサマーの結晶構造。
参考文献：Bennett E M, et al. Journal of Biological Chemistry, 2003, 278(47): 47110-47118.