分光光度法アッセイを用いたプリンヌクレオシドホスホリラーゼの酵素活性測定

Creative Enzymesは、高品質なバイオアナリティカルサービスを提供するリーディングカンパニーです。当社は、酵素活性解析に特化した受託型のカスタム研究サービスを提供し、世界中のお客様のニーズにお応えしています。最新鋭の分光光度計を完備し、すべてのアッセイを専門的かつ迅速に実施します。ここに、プリンヌクレオシドホスホリラーゼの信頼性の高い活性アッセイをご提供できることを誇りに思います。

プリンヌクレオシドホスホリラーゼ（EC 2.4.2.1；PNPase）は、プリンヌクレオシド（イノシンおよびグアノシン）ならびにデオキシヌクレオシド（デオキシイノシンおよびデオキシグアノシン）を、それぞれ対応するプリン塩基およびペントース1-リン酸へ可逆的に変換する反応を触媒する酵素です。プリンヌクレオシドホスホリラーゼは広く存在する酵素であり、サルベージ代謝経路において重要な役割を担うとともに、生細胞におけるDNAの適切な合成および分解に必須です。

プリンヌクレオシドホスホリラーゼは、さらに三量体型と六量体型の2クラスに分類されます。三量体型プリンヌクレオシドホスホリラーゼ（哺乳類プリンヌクレオシドホスホリラーゼとも呼ばれる）は、6-オキソプリンヌクレオシドに特異的であり、高等生物および原核生物の双方に見出されます。六量体型プリンヌクレオシドホスホリラーゼは下等生物にのみ存在し、より広い基質特異性を有しており、6-アミノおよび6-オキソプリンヌクレオシドの双方を受容します。三量体型と六量体型のプリンヌクレオシドホスホリラーゼでは活性部位残基に顕著な差異が認められるものの、反応機構は類似していると考えられています。六量体型と三量体型の間にみられる基質特異性の差異は、抗がん自殺遺伝子治療に向けた戦略を示唆します。このため、プリンヌクレオシドホスホリラーゼはがん治療への応用を目的として、ますます注目を集めています。さらに、ヒトにおける三量体型プリンヌクレオシドホスホリラーゼ活性の欠損は、T細胞増殖の異常を介して選択的免疫不全を引き起こします。したがって、新規の選択的免疫抑制薬および抗がん剤の開発においては、本酵素阻害剤の探索が有用となります。

プリンヌクレオシドホスホリラーゼの機能的意義を検討するためには、その活性をモニタリングできることが極めて重要です。この目的に応えるべく、Creative Enzymesは、酵素の探索および手法最適化に関する豊富な経験に基づき、プリンヌクレオシドホスホリラーゼの高精度な活性アッセイを提供しています。本酵素の活性は、尿酸の遊離を分光光度法により測定し、293 nmにおける吸光度から算出します。

長年にわたる研究開発の実績を背景に、Creative Enzymesは酵素活性測定サービス分野における世界的リーダーへと成長してきました。酵素応用に至るまでの過程でいかなる課題があっても、Creative Enzymesは次のステージに求められる要件を常に満たし、最適なサービスプロバイダーとしてお客様を支援します。

図：E. coliプリンヌクレオシドホスホリラーゼ六量体の結晶構造。
参考文献：Bennett E M, et al. Journal of Biological Chemistry, 2003, 278(47): 47110-47118.