グリコシル、ヘキソシル、ペントシル転移酵素の酵素活性測定

クリエイティブエンザイムズは、ヘキソシルトランスフェラーゼやペントシルトランスフェラーゼを含むグリコシルトランスフェラーゼの酵素活性アッセイを正確かつ再現可能に提供します。私たちのサービスは、アッセイの実施の難しさだけでなく、試験結果の優れた品質とデータ収集の一貫性によって、すべてのサービス供給者の中で際立っています。クリエイティブエンザイムズは、グリコシルトランスフェラーゼ活性の定量化における専門知識を持ち、満足のいく結果を提供し続けます。

グリコシルトランスフェラーゼ（GT、GTF）は、EC 2.4として指定された酵素群で、グリコシド結合の形成を触媒します。これらは、活性化されたヌクレオチド糖（グリコシルドナーとして知られ、しばしば糖リン酸）からヌクレオフィリックなグリコシルアクセプター分子にグリコシル基を転送します。アクセプターのヌクレオフィリック基は、酸素、炭素、窒素、または硫黄に基づく基であり、対応するO-、C-、N-、またはS-グリコシドを生成し、これらは単糖、オリゴ糖、または多糖の一部である可能性があります。ほとんどのグリコシルトランスフェラーゼは、反応を触媒するために金属イオンに依存しており、ドナーのリン酸基は通常、マンガンなどの二価カチオンによって配位されています。しかし、金属に依存しない酵素も存在します。

生成物の立体化学に基づいて、EC 2.4酵素は反転グリコシルトランスフェラーゼと保持グリコシルトランスフェラーゼに分けることができます。名前が示すように、反転グリコシルトランスフェラーゼは基質とは逆の方向のグリコシド結合を持つ生成物を与え、一方、保持グリコシルトランスフェラーゼの生成物は基質から反転したアノミック中心の構成を示します。これら二つの酵素は、化学合成ではほとんど達成できない自然の生合成の変動性を示しています。あるいは、グリコシルトランスフェラーゼは、アミノ酸配列のアラインメントの結果に基づいて約100のGTファミリーに分類することもできます。各GTファミリーには、配列、相関、および折りたたみによって関連する酵素が含まれています。したがって、触媒メカニズムは各ファミリー内で主に保存されており、あまり研究されていないGTに対しても有益な予測を行うことができます。

グリコシルトランスフェラーゼは、主に生物医学的応用やさまざまなグリコシドおよびグリココンジュゲートの合成において大きな可能性を示しました。また、食事栄養や環境保護にとって重要な製品も含まれています。前述のように、GTは領域および立体特異的なグリコシドを作成するのに非常に効率的であり、特定のグリココンジュゲートのターゲット合成や差別的にグリコシル化されたライブラリの構築に使用されます。一方で、いくつかのオリゴ糖および多糖は、さまざまなタンパク質の翻訳後修飾や細胞膜の生合成に重要であるため、GTは多くの病気の潜在的な治療法としても人気のあるターゲットです。たとえば、エタンブトールはミコバクテリアのアラビノトランスフェラーゼの阻害剤であり、結核の治療に使用されます。カスポフンギンはエキノカンジンから開発され、抗真菌剤です。モエノマイシンはペプチドグリカングリコシルトランスフェラーゼの阻害剤であり、動物飼料に成長促進剤として使用されます。

全体として、GTは近年、より高い触媒効率とより安定した性能を目指してますます研究されています。しかし、酵素特性評価の最初のステップとして、GTの活性アッセイは、一般的に基質の入手可能性が低く、感度の高い検出方法が不足しているため、実施が難しいです。この課題を解決するために、クリエイティブエンザイムズは、酵素活性を正確に監視できるさまざまなテストを開発しました。これには、クロマトグラフィーアッセイや連結酵素アッセイが含まれます。これらのアッセイの大部分は技術的に難しく、限られた企業のみが適切に実施できます。クリエイティブエンザイムズは、すべての業界の顧客にこれらのテストを提供できることを誇りに思っています。強力な科学者チームの支援と高級分析機器の利点により、私たちは一貫して高品質な活性測定を認識されています。各クライアントには、最も適切なアッセイの選択と最適化を確実にするために、分析リクエストの詳細をできるだけ多く共有することをお勧めします。

図：複数の配列アラインメントによって示されたβ-Kdoグリコシルトランスフェラーゼの根のない系統樹。
参考文献：Ovchinnikova, O. G.; Mallette, E.; Koizumi, A.; Lowary, T. L.; Kimber, M. S.; Whitfield, C. Proc. Natl. Acad. Sci. 2016。