硫酸アデニリルトランスフェラーゼの酵素活性測定

Creative Enzymesは、酵素活性測定を専門としています。各種酵素の長年にわたる試験実績と新規手法の開発を通じて豊富な知見を蓄積しており、最高水準の活性アッセイサービスの提供を可能にしています。酵素試験サービスの中でも、硫酸アデニリルトランスフェラーゼの活性測定は特にご依頼の多いサービスの一つです。

硫酸アデニリルトランスフェラーゼ（EC 2.7.7.4）は、ATPから無機硫酸へアデニリル基を転移し、アデノシン5’-ホスホ硫酸（APS）およびピロリン酸（PPi）を生成する反応を触媒する酵素です。本反応により高エネルギーのリン酸‐硫酸混合酸無水結合が形成され、硫黄同化経路を駆動します。硫酸アデニリルトランスフェラーゼは自然界に広く分布し、事実上あらゆる生物群で見出されていますが、その生理学的役割は生物の代謝様式に応じて異なります。多くの真核生物および細菌では、本酵素は無機硫酸（SO₄^2-）を活性化して有機化合物へ取り込むタンパク質カスケードの初発酵素として機能します。硫酸アデニリルトランスフェラーゼにより生成したAPSは、その後3’位がリン酸化され、3’-ホスホアデノシン5’-ホスホ硫酸（PAPS）となります。多くの植物および微生物細胞では、硫酸アデニリルトランスフェラーゼとAPSキナーゼは独立したタンパク質として存在します。一方、動物および一部の細菌では、これら2つの硫酸活性化酵素の活性が単一のポリペプチド鎖上に共局在する「PAPSシンテターゼ」を有しています。

硫酸アデニリルトランスフェラーゼは自然界において極めて重要な役割を担います。第一に、菌類、酵母、ほとんどの従属栄養細菌、藻類、および高等植物では、本酵素は無機硫酸を有機分子（例：システイン、メチオニン）へ還元同化する細胞内反応の初発段階を触媒します。第二に、嫌気性の硫酸還元細菌（例：Desulfovibrio）では、従属栄養代謝における終末電子受容体として機能させるためにAPSを生成します。第三に、特定の化学合成独立栄養細菌および光合成独立栄養細菌（例：Aquifex, Thiobacillus）では、還元型無機硫黄化合物を硫酸へ酸化する最終反応を触媒します。このように、硫酸アデニリルトランスフェラーゼは多面的かつ重要な機能を有することから、近年ますます注目を集めています。

図：Saccharomyces cerevisiae由来硫酸アデニリルトランスフェラーゼの結晶構造。
PDB：1G8F

Creative Enzymesは、硫酸アデニリルトランスフェラーゼに対する信頼性の高い酵素アッセイを迅速かつ高精度に実施可能です。本酵素の活性は、乳酸脱水素酵素（LDH）‐ピルビン酸キナーゼ（PK）連結法を用いた連続分光光度法により測定します。ホスホエノールピルビン酸、ピルビン酸キナーゼ、乳酸脱水素酵素、およびNADHの存在下で、生成物形成をNADHの酸化に連結させて定量します。340 nmにおける吸光度低下を分光光度計でモニタリングします。なお、Creative Enzymesの酵素アッセイは、グローバル市場において高い信頼性と実証実績を有しており、リピート率の高い高品質サービスにつながっています。最終的に、Creative Enzymesは、お客様にとって最も信頼できるパートナーであることを誇りとしています。