ホスホグリセリン酸キナーゼの酵素活性測定

Creative Enzymesは、酵素活性測定に特化した主要サービスプロバイダーです。過去数年間にわたり多数の酵素活性を評価してきた実績に基づき、ホスホグリセリン酸キナーゼをはじめとする各種トランスフェラーゼに対して、迅速かつ高品質な酵素活性アッセイサービスを提供しています。

ホスホグリセリン酸キナーゼ（EC 2.7.2.3；PGK）は、Mg²⁺を必須補因子として、3-ホスホグリセリン酸（3-PG）を1,3-ビスホスホグリセリン酸（1,3-bisPG）へATP依存的にリン酸化する反応を触媒する酵素であり、可逆反応として進行します。本酵素はあらゆる生物に存在し、細胞内の異なる区画に局在する複数の形態が認められます。光合成生物では、PGKはカルビン・ベンソン回路による炭素固定に続く反応段階を触媒するうえで中心的役割を担います。また、PGKは解糖系におけるATP産生酵素2種のうちの1つでもあります。糖新生経路ではPGKが逆反応を触媒しますが、生化学的標準条件下では解糖方向が優先されます。

PGKの分子構造は、これまでに検討されたすべての種において高度に保存されています。PGKは単量体酵素であり、リンカーとなるαヘリックスによって連結されたN末端ドメインおよびC末端ドメインの2ドメインから構成されます。2つのドメイン間相互作用を制御するコンフォメーション変化が、リン酸基転移の開始に関与します。ヒトでは、PGKはPGK1およびPGK2の2つのアイソフォームに分類されます。

PGK欠損症は、ヒトにおいて溶血性貧血、精神神経障害、ならびにミオパチーとの関連が報告されています。さらに、PGK1の過剰発現は胃がんとの関連が示されています。また、PGKはヌクレオチド基質に対する広い特異性を有することから、HIV抗レトロウイルス薬のリン酸化および活性化においても重要な役割を果たします。このため、PGKは製薬企業およびバイオテクノロジー研究機関からの注目が高まっています。PGKの機能的意義を円滑に検討するには、PGK活性を正確にモニタリングできることが不可欠です。ここに、Creative EnzymesはPGKに対する精緻な酵素アッセイを提供します。当社では、解糖系の前段階に由来するグリセルアルデヒド-3-リン酸デヒドロゲナーゼとのカップリング反応を用いてPGK活性を測定します。NADH消費を時間依存的に追跡し、340 nmにおける吸光度変化としてモニタリングします。Creative Enzymesのサービスは、市場において高い信頼性と実績を有し、多くのお客様から高い評価をいただいています。Creative Enzymesは、酵素の産業化および商業化というお客様の目標達成を、信頼できるパートナーとして継続的に支援いたします。

図： E. coli（大腸菌）ホスホグリセリン酸キナーゼの結晶構造。本構造は、αヘリックスリンカー（茶色）で連結された2つの球状ドメイン、Nドメイン（銀色）およびCドメイン（金色）の存在を示しています。
参考文献： Young T A, Skordalakes E, Marqusee S. Journal of Molecular Biology, 2007, 368(5): 1438-1447.