パントテイン-リン酸アデニル転移酵素の酵素活性測定

クリエイティブエンザイムズは、酵素活性アッセイにおける最新の開発と発見を紹介します。最高品質のサービスを常に追求することで、クリエイティブエンザイムズは数千の顧客の信頼を得ています。私たちは、高度にカスタマイズされた正確なバイオアナリティカルサービスを専門としています。ここでは、パンテテイン-リン酸アデニル転移酵素の最も信頼性の高い酵素アッセイを提供できることを嬉しく思います。

コエンザイムA（CoA）は、すべての生細胞における主要なアシル基キャリアであり、中間代謝における多くの反応に必要です。CoAは、さまざまな生合成、分解、エネルギー生成の代謝経路において重要な役割を果たします。生細胞内で、CoAはパンテトン酸（ビタミンB₅）、システイン、およびATPから5つのステップで合成されます。パンテテイン-リン酸アデニル転移酵素（EC 2.7.7.3; PPAT）は、この生合成経路における前々段階のステップを触媒し、4'-ホスホパンテテインをアデニル化して脱リン酸CoAを生成します。脱リン酸CoAキナーゼ（EC 2.7.1.24）によるリボース環の3'-ヒドロキシルでのその後のリン酸化により、アシル基キャリアであるCoAが生成されます。CoAの生合成速度は、この経路の最初の酵素であるパンテトン酸キナーゼ（EC 2.7.1.33）のフィードバック阻害によって調節されます。CoA生合成の中間体の研究により、パンテトン酸と4'-ホスホパンテテインの両方が細胞内に蓄積する可能性が示されており、PPATがCoA生合成経路における追加の速度制限ステップを触媒する可能性があることが示唆されています。

図1: E. ColiにおけるCoAの生合成。
参考文献: Miller J R, et al. Journal of bacteriology, 2007, 189(22): 8196-8205.

PPATは、ヌクレオチジル転移α/βホスホジエステラーゼファミリーの酵素の一員であり、ヌクレオチド一リン酸部分を他の基質に転送します。細菌のPPATはすべてアロステリックホモヘキサマーです。PPATは、CoA生合成経路における重要な調節ステップを触媒するため、魅力的な抗菌ターゲットとなります。また、ヒトのPPATは細菌のそれとは異なる構造を持っています。

PPATの活性は、連結アッセイによって分光光度計的に測定できます。たとえば、PPAT活性は、ATP生成をNADP+還元に結びつけるためにヘキソキナーゼとグルコース-6-リン酸脱水素酵素を使用して逆方向でアッセイされます。アッセイは室温で行われ、340 nmでの吸光度の変化が監視されます。私たちの結果の品質は、最も先進的な分光光度計によって保証されています。私たちは、典型的な活性測定または特別なニーズのリクエストに応じて迅速なアッセイのターンオーバーで競合他社を上回ります。全体として、クリエイティブエンザイムズは信頼できるパートナーであり、あなたのビジネスを獲得することを楽しみにしています。

図2: E. Coli由来のパンテテイン-リン酸アデニル転移酵素の結晶構造。
PDB: 1H1T