クレアチンキナーゼの酵素活性測定

Creative Enzymesは、酵素アッセイを専門とする産業バイオテクノロジー企業です。当社は多様で独自性のあるお客様と連携し、新製品開発およびプロセス最適化を支援しています。当社サービスにおける最高水準の品質基準は、グローバルな成功の柱の一つであり、高度な顧客満足の基盤です。ここに、Creative Enzymesはクレアチンキナーゼの正確な活性アッセイを提供できることを喜んでご案内いたします。

クレアチンキナーゼ（EC 2.7.3.2；ATP:クレアチンN-ホスホトランスフェラーゼ；CK）は、Mg-ATPからクレアチン（Cr）へN-リン酸基を可逆的に転移し、ホスホクレアチン（PCr）およびMg-ADPを生成する反応を触媒する酵素です。本酵素は当初、ウサギ骨格筋から結晶形として単離されました。クレアチンキナーゼは、動物界全体に広く存在し高度に保存されたホスファゲン（グアニジノ）キナーゼファミリーの一員です。クレアチンキナーゼは脊椎動物に存在する唯一のホスファゲンキナーゼですが、海綿動物、多毛類、棘皮動物など多くの無脊椎動物にも認められます。クレアチンキナーゼには細胞内局在に基づき4種類のアイソザイムが存在します。例えば、細胞質型として筋型（MM-CK）および脳型（BB-CK）の2種類があります。さらに、ミトコンドリア型として、等電点に基づき分類されたユビキタス型（uMt-CK）およびサルコメア型（sMt-CK）の2種類があります。

図1： クレアチンキナーゼが触媒する反応。
参考文献： McLeish M J, Kenyon G L. Critical reviews in biochemistry and molecular biology, 2005, 40(1): 1-20.

クレアチンキナーゼは、高く変動しやすいエネルギー需要を有する細胞において、エネルギーホメオスタシスを維持する重要なシステムに関与しています。クレアチンキナーゼが高レベルで存在することでADPおよびATP濃度はほぼ一定に保たれ、ATPの急速な枯渇に対して細胞を効果的に緩衝します。さらに、クレアチンキナーゼは臨床的にも重要であり、その血中濃度は心筋および骨格筋障害の指標として日常的に用いられ、急性心筋梗塞の治療においても活用されます。したがって、クレアチンキナーゼはエネルギーホメオスタシスおよび診断学の両面で重要な役割を担っています。このため、クレアチンキナーゼの酵素活性測定は、より多くの臨床研究および医薬品研究において必要と考えられます。

酵素試験および測定法最適化に関する長年の経験に基づき、Creative Enzymesはクレアチンキナーゼの酵素アッセイを精密に提供するための十分な能力と体制を有しています。クレアチンキナーゼ活性は、カップリング酵素系を用いた連続分光光度分析により測定します。順反応（ホスホクレアチン生成）は、ピルビン酸キナーゼおよび乳酸脱水素酵素とのカップリングにより、340 nmで追跡可能です。逆に、ATP生成も、ヘキソキナーゼおよびグルコース-6-リン酸脱水素酵素とのカップリングにより、340 nmで追跡できます。当社の試験結果の品質はグローバル市場で高く信頼され、実績により裏付けられています。多くのお客様が長年にわたりCreative Enzymesをご愛顧くださっています。総じて、クレアチンキナーゼに関わるあらゆる開発において、Creative Enzymesは最適な選択肢です。

図2： ヒト脳型クレアチンキナーゼの結晶構造。
PDB：3DRB