アラニン脱水素酵素の酵素活性測定

Creative Enzymesは、長年にわたり酵素の触媒活性定量法の研究・開発に取り組んでおり、アラニン脱水素酵素の酵素活性アッセイをご提供できる十分な自信を有しています。当社の徹底した品質へのこだわりと万全のサービスは、市場における卓越した評価によって裏付けられています。

アラニン脱水素酵素（EC 1.4.1.1）は、ピルビン酸とアンモニアからL-アラニンへの可逆的変換を触媒し、同時にNADHを生成する酵素です。生成されたNADHは、多くの生合成過程において水素供与体として機能します。ピルビン酸の還元的アミノ化は、アラニン生合成につながるとともに、遊離アンモニアを細胞内タンパク質へ取り込む手段を提供する点で重要です。本酵素群の系統名はL-アラニン:NAD⁺オキシドレダクターゼ（脱アミノ化）であり、以下の名称でも知られています。

• AlaDH；
• L-アラニン脱水素酵素；
• NAD⁺結合型アラニン脱水素酵素；
• α-アラニン脱水素酵素；
• NAD⁺依存性アラニン脱水素酵素；
• アラニンオキシドレダクターゼ；
• NADH依存性アラニン脱水素酵素

アラニン脱水素酵素活性は、休止菌体懸濁液および無細胞抽出液を用いた検討により、幅広い細菌種で確認されています。抗酸菌では、当初、ワクチン株であるM. bovis BCGには欠如する一方、病原性の高いMycobacterium tuberculosisには存在する酵素として同定されました。機能的アラニン脱水素酵素の欠如によりM. bovis BCGのヒト体内での複製が障害され、その結果、防御免疫の成立が抑制される可能性が示唆されています。他の細菌由来アラニン脱水素酵素とは異なり、M. tuberculosis由来アラニン脱水素酵素は、グリオキシル酸またはピルビン酸のいずれも基質として利用できる多基質特異性酵素です。本酵素は、NADHのNAD⁺への酸化と共役して、ピルビン酸をアラニンへ、またはグリオキシル酸をグリシンへ還元します。逆反応では、アラニンをピルビン酸へ酸化（ALD）しますが、グリシンは基質として利用しません。したがって、M. tuberculosisがNRP状態へ移行する際のレドックスバランス維持において、アラニン脱水素酵素が重要な役割を担うことが提案されています。なお、M. tuberculosisは結核の原因菌であり、世界人口の約3分の1に相当する感染者が存在するとされ、毎年約200万人の死亡の原因となっています。

以上より、アラニン脱水素酵素は医療・製薬産業において極めて有用な酵素であることが分かります。さらに、アラニン脱水素酵素は条件、あるいは種の違いに応じて複数の役割を担う可能性があります。このため、本酵素の触媒活性定量は今後ますます注目されるべき領域です。Creative Enzymesでは、分光光度法によるアラニン脱水素酵素の触媒活性測定サービスをご提供しており、25°Cにて340 nmの吸光度変化を追跡することで測定が可能です。最高水準の品質を追求し続けることで、Creative Enzymesは数多くのお客様から信頼を獲得しており、高度に洗練された研究支援サービスを幅広く提供しています。アラニン脱水素酵素に関わるあらゆる研究・開発活動において、Creative Enzymesは最適なパートナーです。

図：M. tuberculosis由来アポL-アラニン脱水素酵素の結晶構造。
PDB：2VHY