分光光度法アッセイを用いたL-グロン酸3-デヒドロゲナーゼの酵素活性測定

Creative Enzymesは、正確かつ信頼性の高い活性測定サービスを提供する専門機関です。迅速で有効な試験法の提供における豊富な実績により、精度の高いアッセイ結果を保証します。さらにCreative Enzymesは、他の受託サービスプロバイダーでは測定されることの少ない酵素の解析にも特化しています。その一例であるL-グロン酸3-デヒドロゲナーゼについても、Creative Enzymesは独自技術を用いて十分に特性解析および測定を行ってきました。

L-グロン酸3-デヒドロゲナーゼ（GDH；EC 1.1.1.45）は酸化還元酵素の一種で、L-グロン酸から3-デヒドロ-L-グロン酸への変換を触媒し、副生成物としてNADHを生成します。GDHは、L-3-ヒドロキシ酪酸やL-スレオネートなど、3-ヒドロキシ基を有する複数の有機酸に対しても追加的な脱水素酵素活性を示します。本酵素のその他の一般名には以下が含まれます。

• L-3-アルドネートデヒドロゲナーゼ；
• L-3-アルドン酸デヒドロゲナーゼ；
• L-グロン酸デヒドロゲナーゼ；
• L-β-ヒドロキシ酸デヒドロゲナーゼ；
• L-β-ヒドロキシ酸-NAD⁺-オキシドレダクターゼ；
• L-3-ヒドロキシ酸デヒドロゲナーゼ

L-グロン酸3-デヒドロゲナーゼはNAD⁺依存性酵素です。本酵素は、グルクロン酸抱合体、グリコサミノグリカン、アスコルビン酸などの機能性分子の生合成に必須とされる、グルコース代謝の代替経路であるウロネート回路において重要な役割を担います。本酵素は哺乳類およびDrosophila melanogasterの多様な組織に存在します。一方、ヒトではGDHは非水晶体組織にのみ存在し、患者の肝細胞癌組織では発現レベルが低下していることが報告されています。これまでに同定されているL-グロン酸3-デヒドロゲナーゼの結晶構造はウサギ由来酵素のもののみです。そのため、この新規酵素群の機能的特性をより深く理解するためには、他由来のGDH結晶構造に基づく追加情報が求められています。こうした研究ニーズに応えるべく、Creative Enzymesは、酵素学的知見と生物産業分野での利用関心の高まりとの間に拡大するギャップを埋める、適切な活性アッセイを提供しています。当社は、酵素活性を定量するための信頼性の高い分光光度法アッセイを確立しています。NAD⁺とNADHはUV吸収スペクトルが明確に異なるため、EC 1.1.1.45の触媒活性は、UV/可視分光光度計により、260 nmにおけるNAD⁺の還元、または340 nmにおけるNADHの酸化のいずれかを追跡することで測定できます。

図：ウサギL-グロン酸3-デヒドロゲナーゼの結晶構造。
参考文献：Yukuhiko Asada et al. J. Mol. Biol. 2010 401: 906–920

Creative Enzymesは、酵素活性アッセイ分野におけるリーディングカンパニーです。最先端の設備と、他に類を見ない酵素活性測定技術を有しています。卓越したサービスと高品質な試験により、Creative Enzymesは数千社のお客様のご支援のもと急速に成長しており、近い将来、貴社の事業に貢献し、信頼を獲得できるよう努めてまいります。