アルコール脱水素酵素の酵素活性測定のための分光光度法アッセイの使用

クリエイティブエンザイムズは、分光光度法アッセイを使用してアルコール脱水素酵素の活性を測定する特別なサービスで知られています。当社の活性試験結果は、長年のサービス経験のおかげで非常に正確で再現性があります。当社のコア技術により、純粋なアルコール脱水素酵素や混合物中の酵素のためのさまざまな基質の選択肢を用いて、アルコール脱水素酵素の活性アッセイをリードしています。

アルコール脱水素酵素（ADH、EC 1.1.1.1）は、一次または二次アルコール、またはヘミアセタールに作用し、補因子NAD（ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド）の還元を介してそれらをアルデヒドまたはケトンに変換する脱水素酵素のグループです。アルコール脱水素酵素は亜鉛タンパク質で、80 kDaの質量を持つ二量体複合体を形成します。これらの酵素は人間を含む多くの生物に存在し、解糖系/糖新生、脂肪酸分解、グリシン、セリン、チロシン、スレオニンおよびα-リノレン酸の代謝、塩素化アルカンおよび塩素化アルケンの分解、ナフタレンの分解、レチノールの代謝、シトクロムP450による外因性物質の代謝、シトクロムP450による薬物代謝、二次代謝物の生合成、抗生物質の生合成など、さまざまな生物学的活動に関与しています。例えば、人間や多くの他の動物では、アルコール脱水素酵素はアルコールを分解して中毒を避ける役割を果たします。酵母、植物、および多くの細菌では、一部のアルコール脱水素酵素が逆反応、すなわちアルデヒドおよびケトンの還元を触媒し、NADの酸化と結合して発酵のために十分なNAD+を常に生成します。酵素が触媒する反応の数が多いため、他の名前でも呼ばれることがあります。

• アルデヒド還元酵素;
• 脂肪族アルコール脱水素酵素;
• エタノール脱水素酵素;
• NAD依存性アルコール脱水素酵素;
• NAD特異的芳香族アルコール脱水素酵素;
• NADH-アルコール脱水素酵素;
• NADH-アルデヒド脱水素酵素;
• 一次アルコール脱水素酵素;
• 酵母アルコール脱水素酵素。

分光光度法アッセイは、アルコールの酸化中にNAD+がNADHに還元されることが340 nmで便利に検出できるため、アルコール脱水素酵素の酵素活性を定量するためによく使用されます。しかし、アルコール脱水素酵素の基質特異性は非常に広範であり、多くの一次および二次アルコールをカバーしています。例えば、動物由来の酵素は、酵母ではなく、環状二次アルコールの酸化も触媒します。したがって、従来のアッセイ法は、いくつかの反応条件下で問題がある可能性があります。さらに、場合によっては、唯一利用可能なサンプルがアルコール脱水素酵素アイソザイムまたは他の酵素との混合物であることがあり、活性測定をさらに困難にします。クリエイティブエンザイムズは、牛肝抽出物や発酵リサイテなどの複雑な条件下でアルコール脱水素酵素の活性を正確に測定する堅牢な活性アッセイを確立しました。エタノール以外の非従来の基質が存在する場合でも、アルコール脱水素酵素の特性を深く理解することで、最も困難な活性測定に対応できるようになります。従来の分光光度法アッセイに加えて、迅速な活性スクリーニングや特別なシステムでの酵素活性の報告など、特別なニーズを満たすことができる比色法アッセイも開発しました。

全体として、クリエイティブエンザイムズは、アルコール脱水素酵素の活性測定において信頼できるパートナーです。私たちは、アルコール脱水素酵素の酵素アッセイにおいて、まだお客様を失望させたことはありません。活性の定量は、クリエイティブエンザイムズを選ぶまで、これほど簡単ではありませんでした。

図：人間の有毒なホルムアルデヒドの代謝を助けるアルコール脱水素酵素クラス3の構造。