分光光度法アッセイを用いた3-ヒドロキシ酪酸デヒドロゲナーゼの酵素活性測定

Creative Enzymesは酵素活性測定を専門としています。過去数年間にわたり多様な酸化還元酵素の活性を評価してきた実績に基づき、Creative Enzymesは豊富かつ専門的な知見を蓄積しており、3-ヒドロキシ酪酸デヒドロゲナーゼを含む迅速で高品質な酵素活性アッセイサービスを提供しています。

3-ヒドロキシ酪酸デヒドロゲナーゼはSDR（短鎖デヒドロゲナーゼ）ファミリーに属します。本酵素は補酵素としてNAD+を用い、（R）-3-ヒドロキシ酪酸からアセト酢酸への変換を触媒します。また、他の3-ヒドロキシ一価カルボン酸も酸化します。本酵素には以下の別名があります。

• NAD-β-ヒドロキシ酪酸デヒドロゲナーゼ
• ヒドロキシ酪酸オキシドレダクターゼ
• β-ヒドロキシ酪酸デヒドロゲナーゼ
• D-β-ヒドロキシ酪酸デヒドロゲナーゼ
• D-3-ヒドロキシ酪酸デヒドロゲナーゼ
• D-（-）-3-ヒドロキシ酪酸デヒドロゲナーゼ
• β-ヒドロキシ酪酸デヒドロゲナーゼ（β-ヒドロキシ酪酸）
• 3-D-ヒドロキシ酪酸デヒドロゲナーゼ
• β-ヒドロキシ酪酸デヒドロゲナーゼ

3-ヒドロキシ酪酸デヒドロゲナーゼはラット肝ミトコンドリアで見出され、ヒト心臓、ウシ心臓、およびラット肝臓から精製されています。また、多くの微生物にも存在します。本酵素の活性発現にはホスファチジルコリンを特異的に要求します。一方、細菌由来酵素は活性にリン脂質を必要としません。本酵素はケトン体の合成および分解、ならびに酪酸代謝に関与します。そのため、Rhodobacter sp.7由来酵素は糖尿病におけるケトン体の診断分析に用いられており、重要な診断用試薬としての高いポテンシャルが示されています。

本酵素の構造はホモ四量体であることが示唆されています。DL-2-ヒドロキシ酪酸およびDL-乳酸は有効な阻害剤であり、またカコジル酸ナトリウムも酵素活性を強力に阻害します。Creative Enzymesは、研究過程で生じ得る複雑な条件にも対応し、正確かつ信頼性の高い活性アッセイ結果を提供します。さらに、3-ヒドロキシ酪酸デヒドロゲナーゼはL-3-ヒドロキシ酪酸、L-スレオニン、D-スレオニン、L-セリン、D-セリン、DL-グリセリン酸などの基質を含む一部のβ-ヒドロキシ酸も触媒し得ることから、Creative Enzymesではお客様の要件に応じて、指向性または定量的な基質特異性試験も提供しています。

図：NAD+と複合体を形成したPseudomonas fragi由来D-3-ヒドロキシ酪酸デヒドロゲナーゼの結晶構造。
参考文献：Ito K et al. J Mol Biol. 2006 27;355(4):722-33

Creative Enzymesは長年にわたり酵素活性測定分野に携わってきました。豊富で専門的な経験により、お客様および研究者の皆様から高い評価を得ています。今後も、専門性の高いサービスを通じて、皆様の重要な成果達成を継続的に支援してまいります。