シキミ酸脱水素酵素の酵素活性測定のための分光光度法アッセイの使用

Creative Enzymesは、長年にわたり酵素活性アッセイのリーディングカンパニーです。私たちは、産業規模での迅速な活性測定と、特別なリクエストに応じた深くカスタマイズされた活性アッセイを提供しています。プレミアチームは、分光光度法を用いて、シキミ酸脱水素酵素を含む酸化還元酵素の活性測定を専門としています。

シキミ酸脱水素酵素（EC 1.1.1.25）は、NADPH依存的な3-デヒドロシキミ酸のシキミ酸への可逆的な還元を触媒します。この酵素は、カルボニル基の炭素-酸素二重結合をヒドロキシル基に還元し、その間に補因子NADPHはNADP+に酸化されます。この酵素は、シキミ酸経路の1ステップで作用し、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンの生合成に見られます。この経路は、細菌、植物、真菌、藻類、寄生虫にとって不可欠であり、炭水化物の代謝からフェニルアラニン、チロシン、トリプトファンなどの芳香族アミノ酸の生合成を担っています。対照的に、シキミ酸経路は動物や人間には存在しません。その結果、これらの3つの芳香族アミノ酸は、食事を通じて摂取しなければならない必須アミノ酸です。この酵素クラスの系統名はシキミ酸:NADP+ 3-酸化還元酵素であり、以下のようにも知られています：

• デヒドロシキミ酸還元酵素、
• シキミ酸酸化還元酵素、
• シキミ酸:NADP+酸化還元酵素、
• 5-デヒドロシキミ酸還元酵素、
• シキミ酸5-脱水素酵素、
• 5-デヒドロシキミ酸還元酵素、
• DHS還元酵素、
• シキミ酸:NADP+ 5-酸化還元酵素
• AroE。

シキミ酸経路が人間や動物に存在しないため、除草剤や抗菌剤の有望なターゲットとして特定されています。シキミ酸脱水素酵素に関する研究は、新たなトピックとなっており、ますます多くの除草剤や抗生物質が耐性の増加により効果を失っています。さらに、1つの経路におけるブロックされた酵素の多様性を維持することも、より高い細菌殺菌率を達成するために重要です。現在の抗菌治療の厳しい見通しを考えると、シキミ酸脱水素酵素の強力で非毒性の阻害剤の需要は増え続けています。シキミ酸脱水素酵素の活性試験は以前に報告されていますが、アッセイを実施することは決して簡単ではありません。その基質の不安定性や他の酵素からの干渉に対する感受性が、作業を困難にしています。Creative Enzymesは、科学者チームと最先端の機器のサポートを受けて、これらのすべての障害を克服します。酵素活性は、340 nmでの吸収強度を測定することにより、NADPH濃度の変化を通じて、反応のいずれの方向でも正確に監視できます。

Creative Enzymesは、シキミ酸脱水素酵素の最新の活性アッセイを提供できることを嬉しく思い、成功に向けてあなたと協力する意欲があります。あなたが製薬、農業、または獣医産業で働いている場合でも、私たちは常に高品質な活性結果を提供する準備ができています。

図：シキミ酸脱水素酵素の結晶構造、NADPH（黄色）のためのユニークな結合ループ（緑）を示しています。
参考文献：Ye, S. et. al., A. J. Bacteriol. 2003, 185 (14), 4144.