分光光度法アッセイを用いたマンニトール-1-リン酸5-デヒドロゲナーゼの酵素活性測定

Creative Enzymesは、マンニトール-1-リン酸5-デヒドロゲナーゼの活性測定を分光光度法アッセイにより提供できる、世界でも数少ない企業の一つです。当社は、酵素の検出および特性解析における未充足ニーズを満たす活性アッセイの設計を専門としております。Creative Enzymesは、確立された手法に基づき、マンニトール-1-リン酸5-デヒドロゲナーゼについて高精度かつ再現性の高い分光光度法アッセイを実施可能です。

マンニトール-1-リン酸5-デヒドロゲナーゼ（EC 1.1.1.17）は、D-マンニトール1-リン酸（M1P）およびニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（NAD+）からD-フルクトース6-リン酸（F6P）を生成する酵素です。本酵素は酸化還元酵素（オキシドレダクターゼ）ファミリーに属し、特に電子受容体としてNAD+およびNADP+（ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸）を用い、供与体のCH-OH基に作用する酵素群に分類されます。本酵素は、還元反応および酸化反応において、それぞれF6PおよびM1Pに対して非常に高い基質特異性を示します。また、N-エチルマレイミドおよびp-ヒドロキシマーキュリベンゾエートにより活性が阻害され、2-メルカプトエタノールにより阻害が回復することから、スルフヒドリル型酵素であることが示されています。本酵素の最も重要な機能は、マンニトール生合成の調節における鍵酵素として作用し、フルクトースおよびマンノース代謝に関与することです。本酵素クラスの系統名はD-マンニトール-1-リン酸:NAD+ 2-オキシドレダクターゼですが、以下の名称でも知られています：

• ヘキソースレダクターゼ；
• マンニトール1-リン酸デヒドロゲナーゼ；
• D-マンニトール-1-リン酸デヒドロゲナーゼ；
• フルクトース6-リン酸レダクターゼ。

分光光度法アッセイは、アルコールの酸化に伴いNAD+がNADHへ還元される反応を340 nmで簡便に検出できるため、マンニトール-1-リン酸5-デヒドロゲナーゼの酵素活性定量に広く用いられています。分光光度法アッセイの手法は1972年（Ikawa et al.）に早くも報告されていますが、Creative Enzymesでは、お客様の高い要求水準に適合するよう、当該手法に改良を加え最新化しました。F6P還元活性は、340 nmにおけるNADHの減少をモニタリングして測定し、反応はF6Pの添加により開始します。一方、M1P酸化活性は、NADH生成をモニタリングして測定し、反応はM1Pの添加により開始します。

総じて、Creative Enzymesはマンニトール-1-リン酸5-デヒドロゲナーゼの分光光度法アッセイにおける信頼できるパートナーです。当社は、マンニトール-1-リン酸5-デヒドロゲナーゼの酵素アッセイ分野におけるリーディングカンパニーとして実績を有しています。試験結果の信頼性は、最先端の分光光度計機器と、強固な酵素学専門チームにより担保されています。