フルクトース-1,6-ビスホスファターゼの酵素活性測定

Creative Enzymesは、酵素活性アッセイを専門とする産業バイオテクノロジー企業です。当社の伝統に則り、業務およびサービスにおける最高水準の品質基準こそが、グローバルな成功と高い顧客満足の鍵であると確信しています。ここに、フルクトース-ビスホスファターゼに対する高度に洗練された酵素アッセイをご提供いたします。

フルクトース-ビスホスファターゼ（EC 3.1.3.11；D-フルクトース-1,6-ビスリン酸 1-ホスホヒドロラーゼ）は、糖新生経路における律速段階、すなわちフルクトース-1,6-ビスリン酸をフルクトース-6-リン酸および無機リン酸へ加水分解する反応を触媒する酵素です。フルクトース-ビスホスファターゼは糖新生における主要酵素の一つとみなされています。フルクトース-2,6-ビスリン酸およびAMPはフルクトース-ビスホスファターゼを相乗的に阻害し、その作用により糖新生経路全体を潜在的に制限し得ます。本酵素の触媒には二価カチオン（Mg²⁺、Mn²⁺、またはZn²⁺）が必要であり、K⁺やNH₄⁺などの一価カチオンが活性をさらに増強する場合があります。本酵素は細菌、酵母、ならびに高等真核生物に由来するものが特徴付けられています。哺乳類酵素のアミノ酸配列は相互に85%同一であり、細菌におけるクラスIフルクトース-ビスホスファターゼと相同性を示します。Escherichia coliでは、クラスIおよびクラスIIにそれぞれ属するfbp遺伝子およびglpX遺伝子にコードされた2種類のフルクトース-ビスホスファターゼが同定されています。さらに、Bacillus subtilisでは大きく分岐したクラスIIIフルクトース-ビスホスファターゼも同定されています。興味深いことに、複数の古細菌の細胞抽出液においてもフルクトース-ビスホスファターゼ活性が検出されている一方、既報のフルクトース-ビスホスファターゼと構造的類似性を有するオルソログ遺伝子はそれらのゲノム上に存在しません。新規のフルクトース-ビスホスファターゼ群（クラスV）は、好熱性古細菌および超好熱性細菌Aquifex aeolicusに見出されています。

なお、すべてのフルクトース-ビスホスファターゼの中で最も広範に研究されているブタ由来フルクトース-ビスホスファターゼは、サブユニット分子量37 kDaのホモ四量体です。機能的には、フルクトース-ビスホスファターゼは2型糖尿病の治療における創薬標的として位置付けられ得ます。さらに、フルクトース-ビスホスファターゼはバイオテクノロジー、分子生物学、および生合成においても中核的役割を担います。これらの重要な機能により、フルクトース-ビスホスファターゼ活性のモニタリングに対する強いニーズが生じています。

Creative Enzymesは、フルクトース-ビスホスファターゼに対して利用可能な中で最も信頼性の高い酵素アッセイを提供可能です。酵素活性は、グルコース-6-リン酸イソメラーゼ（EC 5.3.1.9）およびグルコース-6-リン酸デヒドロゲナーゼ（EC 1.1.1.49）の存在下でのNADP⁺の還元を追跡することにより、分光光度法で測定します。フルクトース-6-リン酸の生成は等量のNADP⁺の還元をもたらし、340 nmにおける吸光度の増加を測定することでモニタリングします。当社の高品質な酵素アッセイサービスは高い信頼を得ており、数多くのお客様から高い評価をいただいております。信頼できるパートナーとして、Creative Enzymesは今後も専門性の高い品質基準を維持し、効率的なサービスを提供し続けます。

図：ブタ由来フルクトース-ビスホスファターゼの結晶構造。
PDB：1NUY