分光光度法アッセイによるNADPHデヒドロゲナーゼの酵素活性測定

Creative Enzymesは、世界トップクラスの酵素サービスプロバイダーとなることを目指しています。これまで多数のお客様により実証されているとおり、当社の高品質なサービスと専門知識はグローバル市場において高く評価されています。当社が実施する酸化還元酵素の活性アッセイは、信頼性および再現性を保証しています。中でも特にご依頼の多いサービスの一つが、NADPHデヒドロゲナーゼの活性アッセイです。

NADPHデヒドロゲナーゼ（EC 1.6.99.1）は、NADPH依存的に受容体を還元型へと変換する反応を触媒するフラボタンパク質ファミリーです。本反応の第一段階では、フラビン補因子とニコチンアミドとの間で電荷移動複合体が形成され、続いてNADPHからFMNへのヒドリド移動が起こります。本酵素はNADPHにより効率的に還元される一方、NADHとの反応は一部の種において約20倍遅いことが報告されています。本ファミリーの酵素は細菌、酵母、植物、線虫に見出されていますが、その生理学的機能の多くは未解明です。

NADPHデヒドロゲナーゼは、ケトンやエステルを含む各種のα,β-不飽和カルボニル化合物など、多様な基質に作用し得ます。これらの化学物質は有機合成における汎用性の高い中間体です。一般に、従来の化学合成は化学選択性および位置選択性の制約に加え、環境負荷が大きいという課題があります。これに対し、酵素を用いるアプローチは有用な「グリーン」代替法となり得ます。近年、構造と機能の相関に関する研究が急速に進展しています。多くの種間で遺伝子配列の同一性は中程度にとどまる一方、立体構造は非常に類似していることが示されています。これらの酵素はいずれも典型的な（β/α）₈バレル構造からなり、FMNはC末端側に結合しています。新規酵素の探索・活用に関する研究は、特異的基質に対する高い特異性の獲得および触媒効率の向上に寄与します。また、既存のNADPHデヒドロゲナーゼの変異体は、特異な活性を有する酵素を取得するための有効なアプローチでもあります。

図：NADPHデヒドロゲナーゼファミリーに属するPseudomonas putida由来xenobiotic reductase Aの構造。
参考文献：Spiegelhauer, O. et al. J.Mol.Biol. 2010 398: 66-82

Creative Enzymesは、野生型および変異体酵素の双方に適用可能な、NADPHデヒドロゲナーゼ活性の高精度アッセイサービスを提供しています。当社の卓越した技術力と先進的な設備により、お客様の研究を迅速かつ効率的に支援します。酵素活性試験において、Creative Enzymesは常に最適な選択肢です。