NADPH脱水素酵素の酵素活性測定：分光光度法を用いたアッセイ

クリエイティブエンザイムズは、世界クラスの酵素サービスプロバイダーになることを決意しています。過去の多くの顧客の証言によれば、私たちの高品質なサービスと専門知識は、グローバル市場で認められています。私たちの酸化還元酵素の活性アッセイは、信頼性と再現性が保証されています。最も人気のあるサービスの一つは、NADPH脱水素酵素の活性アッセイです。

NADPH脱水素酵素（EC 1.6.99.1）は、受容体からその還元型へのNADPH依存的な還元を触媒するフラボプロテインのファミリーです。この反応の最初のステップは、フラビン補因子とニコチンアミドとの間に電荷移動複合体が形成され、その後NADPHからFMNへの水素転送が行われます。この酵素はNADPHによって効率的に還元されますが、NADHとの反応は一部の種では約20倍遅くなります。このファミリーのメンバーは、細菌、酵母、植物、線虫に見られますが、その生理的機能はほとんど知られていません。

NADPH脱水素酵素は、ケトンやエステルを含むさまざまなα、β-不飽和カルボニル化合物に作用することができます。これらの化学物質は、有機合成における多用途の中間体です。一般的に、従来の化学合成は、化学選択性や位置選択性、さらには高い環境影響によって制限されています。酵素的アプローチは、貴重な「グリーン」代替手段を提供します。最近、構造と機能の関係に関する研究が急速に進展しています。研究によれば、多くの種と共有される遺伝子配列の同一性は中程度であるにもかかわらず、構造は非常に似ています。これらの酵素はすべて典型的な(β/α)₈バレルで構成されており、FMNはC末端に結合しています。新しい酵素の開発に関する研究は、高い特異性を得て、ユニークな基質に対する触媒効率を改善することに貢献しています。既存のNADPH脱水素酵素の変異体も、特別な活性を持つ酵素を得る手段となります。

図：Pseudomonas putidaからの外因性還元酵素Aの構造、NADPH脱水素酵素ファミリーに属します。
参考文献：Spiegelhauer, O. et al. J.Mol.Biol. 2010 398: 66-82

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