一酸化窒素合成酵素（NADPH）の酵素活性測定

クリエイティブエンザイムズは、酵素活性アッセイを専門とする産業バイオテクノロジー企業です。私たちは、多様でユニークな顧客と提携し、プロセス最適化のニーズをサポートしています。私たちの会社の伝統に忠実に、私たちは、私たちの仕事と製品の質が企業の成功の基盤であると固く信じています。ここで、クリエイティブエンザイムズは、硝酸一酸化窒素合成酵素（NADPH）を含む幅広い酵素に対する正確な触媒アッセイを提供できることを誇りに思います。

硝酸一酸化窒素合成酵素（NADPH）（EC 1.14.13.39、L-アルギニン、NADPH:酸素酸化還元酵素（硝酸一酸化窒素形成）；NOS）は、L-アルギニンを硝酸一酸化窒素（NO）とシトルリンに酸化する二段階の反応を触媒する高度に調節されたタンパク質です。この反応は、安定した中間体であるノメガヒドロキシL-アルギニンを介して行われます。最初のステップでは、NOSがL-アルギニンをノメガヒドロキシL-アルギニンに水酸化します。次のステップでは、NOSがノメガヒドロキシL-アルギニンをL-シトルリンとNOに酸化します。このカスケード反応は、還元酵素ドメインの二電子供与体NADPHから酸素酵素ドメインの電子受容体ヘムへ、FADおよびFMNを介して一連のプロトン移動を伴って開始されます。NOSは、哺乳類、植物、細菌などのさまざまな生物に存在します。哺乳類では、NOSには3つの異なるアイソフォームがあります：1）誘導型NOS（iNOS）、これは免疫系を活性化して病原体や微生物を破壊します；2）内皮型NOS（eNOS）、これは平滑筋の弛緩を調節し、血圧を低下させます；3）神経型NOS（nNOS）、これは神経伝達物質の放出を調節し、神経コミュニケーションに関連しています。哺乳類のNOSのすべてのアイソフォームは、ホモ二量体としてのみ活性です。各モノマーは、NADPH、FAD、FMNの結合部位を持つC末端の還元酵素ドメインと、非触媒亜鉛（Zn²⁺）、触媒ヘム、必須補因子H4B（テトラヒドロビオプテリン）、および基質L-アルギニンの結合部位を含むN末端の酸素酵素ドメインで構成されています。

図1：機能的NOSの構造と触媒メカニズム。（A）NOSモノマーは、NADPHからFADおよびFMNへの電子を転送することができます。（B）ヘムの存在下で、NOSは機能的二量体を形成できます。
参考文献：Förstermann, Ulrich et al. European Heart Journal. 2012, 33(7):829-837.

NOは哺乳類における重要なセカンドメッセンジャーであり、血管拡張、平滑筋の弛緩、神経伝達、免疫応答などのさまざまな生物学的プロセスに関与しています。NOの生合成は厳密に調節される必要があります。なぜなら、制御されていないNOの生成は、神経変性疾患、関節炎、敗血症ショック、動脈硬化などのさまざまな病理学的状態に関連しているからです。その結果、NOSはさまざまな障害を治療するための重要な薬剤ターゲットとして機能します。NOSに関するより詳細な知識を得ることで、医療および製薬業界におけるこの酵素の後続の研究を促進する必要があります。触媒活性の分子基盤を探るための研究が行われていますが、完全なNOS触媒の正確なメカニズムは依然として不明です。クリエイティブエンザイムズは、構造と特性に関する深い理解に基づいて、数年のテストと探求を経て酵素の適切な活性アッセイを開発しました。クリエイティブエンザイムズは、酵素活性アッセイの分野でのリーディングカンパニーであり、私たちの製品品質の最高基準は、私たちのグローバルな成功の柱であり、最高の顧客体験の基盤です。

図2：ヒト誘導型硝酸一酸化窒素合成酵素の結晶構造。
PDB: 1NSI