D-ガラクトース 1-デヒドロゲナーゼの酵素活性測定 スペクトロフォトメトリックアッセイを使用して

クリエイティブエンザイムズは、高品質な酵素活性アッセイを提供できる数少ない企業の一つです。先進的な設備と専門の作業チームが、迅速なターンオーバーと高精度で適切な活性測定を実現するのをサポートします。私たちは、D-ガラクトース1-デヒドロゲナーゼを含む酸化還元酵素のテストにおいて、長年の経験があります。

D-ガラクトース1-デヒドロゲナーゼは、D-ガラクトースからD-ガラクトノ-1,4-ラクトンへの変換を触媒し、NADHの生成を伴います。この酵素は酸化還元酵素のファミリーに属し、アゾトバクター・ビネランディなどの多くの細菌に存在することがわかっています。一般的に使用される他の名称は：

• D-ガラクトースデヒドロゲナーゼ；
• β-ガラクトースデヒドロゲナーゼ（あいまい）；
• NAD⁺-依存性D-ガラクトースデヒドロゲナーゼ

この酵素はD-ガラクトース分解II経路に関与しています。多くの微生物では、細胞はD-ガラクトースを成長のために2つの代替経路を通じて利用できます。一つはレロワ経路、もう一つはデ・レイ・ドゥドロフ経路です。デ・レイ・ドゥドロフ経路はペロモナス・サッカロフィラで最初に記述され、いくつかの細菌種で見つかっています。この経路はD-ガラクトースをラクトンに酸化し、その後ラクトンをガラクトナートに酵素的に加水分解します。ガラクトナートは最終的にD-グリセルアルデヒド-3-リン酸とピルビン酸に変換され、どちらも解糖系の主要な代謝物です。デ・レイ・ドゥドロフ経路の重要な酵素は初期酵素であるD-ガラクトースデヒドロゲナーゼであり、デ・レイ・ドゥドロフ経路の最初のステップの中心的な役割を果たします。この酵素はガラクトース代謝などの他の代謝経路にも関与しています。D-ガラクトースの利用における多様な役割のため、D-ガラクトース1-デヒドロゲナーゼはD-ガラクトースを使用した成長メカニズムに関する細菌学的研究の潜在的なターゲットとなっています。D-ガラクトース1-デヒドロゲナーゼの活性定量のための適切な分析方法が、この酵素およびデ・レイ・ドゥドロフ経路に関連する研究をサポートするために必要です。私たちは、340nmでのNADHの吸収を検出することによって効率的に実施できる最も適したテスト方法が分光光度法アッセイであることを示しました。

図：リゾビウム・エトリからのD-ガラクトース-1-デヒドロゲナーゼタンパク質の結晶構造。

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