4-ヒドロキシ安息香酸3-モノオキシゲナーゼの酵素活性測定

多年にわたる酵素アッセイの開発と最適化の経験を持つCreative Enzymesは、グローバル市場における酵素活性測定の最も信頼できるサービスプロバイダーの一つとなっています。私たちの能力は広範で、多種多様な酵素の酵素活性定量のすべての側面をカバーしています。ここで、Creative Enzymesは、4-ヒドロキシ安息香酸3-モノオキシゲナーゼの信頼できる酵素活性アッセイを提供できることを誇りに思います。

4-ヒドロキシ安息香酸3-モノオキシゲナーゼ（EC 1.14.13.2; 4-ヒドロキシ安息香酸、NADPH:酸素オキシドレダクターゼ（3-ヒドロキシ化））は、大規模なピリジンヌクレオチド依存性フラボプロテインモノオキシゲナーゼのファミリーのプロトタイプです。この酵素は、p-ヒドロキシ安息香酸（p-OHB）に二酸素原子を取り込む反応を触媒し、3,4-ジヒドロキシ安息香酸（3,4-DOHB）を生成します。4-ヒドロキシ安息香酸3-モノオキシゲナーゼによる4-ヒドロキシ安息香酸の変換は、3つの基質と3つの生成物を伴う多段階反応です。最初の半反応では、p-OHBとNADPHが酵素に結合し、NADPHがFAD補因子を還元します。その後の酸化反応では、還元されたフラビンが酸素と反応してフラビンC4a-ヒドロペルオキシドを形成し、ヒドロペルオキシドの遠位酸素が基質の位置3に転送されます。

4-ヒドロキシ安息香酸3-モノオキシゲナーゼにおける構造-機能関係の分析は、触媒メカニズムにおいて重要な立体構造変化の役割を明らかにしました。制御された触媒作用は、フラビンとタンパク質が「in」、「out」、および「open」の3つの立体構造の間で移動することによって達成されます。「open」構造は基質の結合と生成物の放出に重要であり、「in」構造は分子酸素との反応とヒドロキシ化に、そして「out」構造はNADPHによるFADの還元に関与します。さらに、4-ヒドロキシ安息香酸3-モノオキシゲナーゼの構造は、反応に関与するNADPHの結合のための認識可能なドメインが存在しないため、異常であることに注意が必要です。

図：Pseudomonas aeruginosaからの4-ヒドロキシ安息香酸3-モノオキシゲナーゼの結晶構造。
PDB: 1K0I

4-ヒドロキシ安息香酸3-モノオキシゲナーゼによって触媒される反応の活性化メカニズムが不明であり、NADPHを含む還元反応もまだ不明であるため、この酵素の活性アッセイは困難で高度なものになる可能性があります。この厄介な問題を解決するために、Creative Enzymesは、さらなる開発と研究の障害を取り除くために、4-ヒドロキシ安息香酸3-モノオキシゲナーゼの専門的な酵素活性アッセイを提供しています。私たちは、340 nmでのNADPHの消費を監視することによって、その酵素活性を測定する信頼できる分光光度法を使用しています。

Creative Enzymesは、酵素活性測定において直面する特定の問題を解決するために、顧客と協力することができます。顧客との密接な連携は私たちのサービスの不可欠な部分であり、多くの顧客が長年にわたり私たちに忠実でいてくれています。全体として、Creative Enzymesは、顧客の満足度の最高レベルを達成し、製品、サービス、品質管理システムの継続的な改善にコミットしています。