ホスホリパーゼDの酵素活性測定

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ホスホリパーゼD（EC 3.1.4.4; PLD）は、ホスホリピッド（PL）のホスホジエステル結合の加水分解を触媒し、ホスファチジン酸（PA）とアルコール部分を生成する普遍的な酵素です。加水分解活性に加えて、PLDはPLの極性頭部群の相互変換も触媒し、これをトランスホスファチジル化と呼びます。トランスホスファチジル化は、PCやレシチンのような非常に豊富なPLから、ホスファチジルエタノールアミン（PE）、ホスファチジルセリン（PS）、ホスファチジルグリセロール（PG）などの自然に少ないPLの合成に特に有用です。合成されたPLは、エマルジョン剤、化粧品の成分、医療製剤、リポソーム調製に使用できます。

図1: PLDによって触媒される反応。加水分解（A）とトランスホスファチジル化（B）。R₁およびR₂は脂肪酸残基のアルキル鎖を示し、X1およびX2は極性頭部群を表します。
参考文献: Damnjanović J, Iwasaki Y. Journal of Bioscience & Bioengineering, 2013, 116(3):271-280.

PLDは1940年代にニンジンとキャベツの葉で最初に発見されました。それ以来、PLDはウイルス、原核生物、真核生物（哺乳類、酵母、植物）に存在することがわかっています。ほとんどのPLDは、PLD、カーディオリピン合成酵素（CLS）、ホスファチジルセリン合成酵素（PSS）、ポックスウイルスエンベロープタンパク質、Yersiniaマウス毒素（Ymt）、チロシル-DNAホスホジエステラーゼおよびいくつかのヌクレアーゼを含むいわゆるPLDスーパーファミリーのメンバーです。すべてのPLDスーパーファミリーのメンバーは、保存されたHxKxxxxDモチーフ（xは任意のアミノ酸）の1つまたは2つのコピーを含んでいます。このHKDモチーフ、特にHis残基は、触媒において重要な役割を果たします。

機能的に、PLDは干ばつ耐性のための遺伝資源スクリーニングのツールとして有用である可能性があります。さらに、PLDは抗癌活性を持つアルキルホスフェートエステルであるオクタデシルホスホ-L-セリンの生産にも使用できます。さらに、PLDは小胞輸送、エンドサイトーシス、エクソサイトーシス、細胞分裂などのさまざまな重要な細胞プロセスの調節因子としても機能します。PLDの発現異常は、多くの異なる癌の進行やパーキンソン病、アルツハイマー病と関連しています。したがって、PLDの活性を監視することの重要な利用は強い需要を促進します。

クリエイティブエンザイムズは、PLDのための最も正確な酵素活性アッセイを提供する能力があります。分光光度法アッセイは、この酵素の活性を測定するための信頼できるコスト効果の高い方法と見なされています。私たちの結果の品質は、最も先進的な分光光度計によって保証されています。全体として、クリエイティブエンザイムズは、最高の顧客満足を提供することで知られる最良のパートナーです。

図2: ストレプトマイセス・アンチビオティクス由来のホスホリパーゼDの結晶構造。
PDB: 2ZE4