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抗体との酵素結合

抗体-酵素コンジュゲートの確立された実践は、酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)、ウエスタンブロッティング、免疫染色、バイオセンサーにすでに適用されています。ELISAでは、二次抗体と結合するために一般的に使用される酵素の主な2種類、すなわちホースラディッシュペルオキシダーゼ(HRP)とアルカリフォスファターゼ(AP)があります。

最近、新しい抗体-酵素コンジュゲート(AEC)が治療薬として開発され、従来の抗体-薬物コンジュゲート(ADC)にはない正確な標的化と高い活性を示しています。通常、標的細胞の最大の外因性浸透と浸透を達成するためには、治療用抗体-酵素製品は主に1:1の抗体/酵素コンジュゲートである必要があります。場合によっては、結合部位も制御する必要があります。

抗体-酵素コンジュゲートは、化学的クロスリンカー、酵素触媒作用、または融合タンパク質を介して酵素と抗体の間に共有結合を誘導することによって生成されます。化学的クロスリンキング手法は、化学的機能性、反応性、サイズが異なる利用可能なクロスリンキング試薬の膨大な多様性を利用します。その中で、グルタルアルデヒド、マレイミド基、アルデヒドが最も一般的に使用されるクロスリンキング試薬を表します。また、融合タンパク質は、特に指向性酵素前駆体療法(ADEPT)での使用のために生成されます。例えば、Ojima-Katoらは最近、Fabの重鎖(Hc)と軽鎖(Lc)のC末端にルシンジッパー(LZ)ペアを持つFab誘導体「Zipbody」の開発を報告しました。これにより、HcとLcの結合と正しいペアリングが強化されます。

Creative Enzymesは、抗体-酵素コンジュゲートの生成サービスを提供しており、設計、準備、精製、特性評価を含みます。私たちは、必要な生物活性と制御された抗体/酵素比を達成するための方法開発に注力しています。高度な技術と機器を用いて、残留酵素や抗体のない精製コンジュゲートを提供します。

  • 抗体断片の生産。
  • 抗体-酵素コンジュゲートの準備。
  • 融合タンパク質戦略。
  • コンジュゲートの精製。
  • 質量分析によるコンジュゲートの検証。

関連セクション

酵素工学と修飾

抗体-酵素融合タンパク質。 図1 Zipbody、抗体-酵素融合タンパク質の一種が、ルシフェラーゼ(Luc)または緑色蛍光タンパク質(GFP)と結合するために使用されます。
(Journal of Bioscience and Bioengineering 2018)

References:

  1. Melton, R.G. (1996) Preparation and purification of antibody-enzyme conjugates for therapeutic applications. Advanced Drug Delivery Reviews. 22(3): 289-301.
  2. Heck, T., Faccio, G., Richter, M., Thöny-Meyer, L. (2013) Enzyme-catalyzed protein crosslinking. Applied Microbiology and Biotechnology. 97(2): 461-475.
  3. Xiao, H., Woods, E. C., Vukojicic, P., Bertozzi, C. R. (2016) Precision glycocalyx editing as a strategy for cancer immunotherapy. Proceedings of the National Academy of Sciences. 113(37): 10304-10309.

私たちの製品は、個人使用のために直接医薬品として使用することはできません。

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