バキュロウイルス/昆虫細胞におけるエクスプレス酵素

過去30年間、バキュロウイルス-昆虫細胞発現システムは、組換えタンパク質の定期的な生産に最も広く使用されるシステムの1つとなりました。 Creative Enzymes は、ウイルスベクターシステムの進化とエンジニアリングされた昆虫細胞株の開発を積極的に行っています。私たちは、バキュロウイルス-昆虫システムにおける酵素発現のための専門的なサービスを提供しています。ベクターデザインと細胞工学における私たちの優れたスキルは、ターゲット酵素を用いた研究の効率を大幅に向上させます。

細胞質内酵素、膜結合タンパク質、またはより複雑な翻訳後修飾を持つ酵素を発現させる場合、バキュロウイルス-昆虫細胞発現システムが好ましく考慮されます。さまざまな転送ベクターの開発、組換えウイルスの分離と定量方法の簡素化、細胞培養技術の進歩、試薬の商業的入手可能性など、多くの技術的改善がこのシステムの人気を高めています。しかし、このシステムの利点は、考慮すべき重要なポイントです。

• 翻訳後修飾

バキュロウイルス-昆虫細胞発現システムでは、組換え酵素は、リン酸化、N-およびO-グリコシル化、正しいシグナルペプチド切断、適切なプロテオリティック処理、アシル化、パルミチル化、ミリスチル化、アミド化、カルボキシメチル化、プレニル化などの適切な真核生物の翻訳後修飾を複雑なく形成できます。これらの修飾の結果、生物学的および抗原的に活性な分子が適切に生成されます。さらに、原核系とは異なり、正しいタンパク質の折りたたみとS-S結合の形成が達成でき、これは一部の大きなサイズの酵素発現に障害となる可能性があります。

• 高い発現レベル

クローン化される遺伝子は、ウイルスのポリヘドリンプロモーターの強い制御下に置かれ、細胞タンパク質の最大30%の異種酵素の発現を可能にします。さらに、最適な大規模培養と組み合わせることで、バキュロウイルス昆虫細胞システムは大量の組換え酵素を生産する可能性を持っています。

• 安全性

発現ベクターは、無脊椎動物に感染するが脊椎動物や植物には感染しないバキュロウイルスから準備されており、安全性が確保されています。脊椎動物に対する固有の安全性により、バキュロウイルス-昆虫システムは他の高等真核生物発現システムに対する魅力的な代替手段となります。

図1: バキュロウイルス昆虫細胞発現システム。野生型ウイルスに感染した細胞（a）では、大量のポリヘドロンとp10が形成されます。ほとんどの場合、組換えウイルス（b）では、ポリヘドリンおよび/またはp10プロモーターが外来遺伝子の発現を促進し、遺伝子カセットがポリヘドリン遺伝子に置き換わり、ポリヘドリン陰性表現型の組換え体が生成され、（c）ポリヘドリンの代わりに高レベルの組換えタンパク質が生成されます。

これらの利点により、昆虫細胞はほぼ本物の真核タンパク質と酵素を生成することが示されています。したがって、この発現システムは生物医学研究や医療および獣医療の実践で広く使用されています。重要な応用の1つは、バキュロウイルス発現タンパク質に基づくサブユニットワクチンの生産です。他の応用は、新たに開発された酵素の発現に見られ、酵素特性を決定します。

専門的な技術サポートと分子生物学および発酵における豊富な経験を持つ Creative Enzymes は、バキュロウイルス-昆虫における酵素発現の専門知識を示しています。特定の要求に応じて、Creative Enzymes は異なるスケールでの発現と生産を提供します。要求された各酵素は、分析証明書が添付された標準管理の下で生産されます。私たちの発現サービスは、信頼性と効率の両方が保証されています。サービスに関する質問があれば、お気軽にお問い合わせください。