グリコシラーゼの酵素活性測定

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グリコシラーゼ（EC 3.2）は、基質からグリコシル基を加水分解反応を介して除去するヒドロラーゼの一種です。グリコシラーゼ酵素は、多くの生物学的プロセスにとって非常に重要であり、すべてのヒト組織に普遍的に存在します。グリコシラーゼは、細胞機能、シグナル伝達、代謝に不可欠です。グリコシラーゼの重要な役割は、すべてのヒトタンパク質の50％以上が糖タンパク質であるという事実によって示されます。さらに、リボースとデオキシリボースは、遺伝情報のキャリアである核酸およびデオキシ核酸の構成要素です。さらに一般的に知られているように、炭水化物、すなわち糖または多糖類は、生物のエネルギー貯蔵と構造構成の主な材料です。したがって、グリコシラーゼの重要性は過小評価できません。触媒活性に基づいて、グリコシラーゼは2つのグループに分類できます：グリコシダーゼ（EC 3.2.1）はO-およびS-グリコシル基質を加水分解するグリコシラーゼであり、DNAグリコシラーゼ（EC 3.2.2）はN-グリコシル基を加水分解する酵素です。

グリコシダーゼは、グリコシドヒドロラーゼまたはグリコシルヒドロラーゼとも呼ばれ、グリコシド結合の加水分解を触媒します。原核生物では、これらの酵素は栄養素の取り込みに深く関与し、細胞内および細胞外環境の両方で機能します。真核生物では、グリコシダーゼは糖タンパク質の生合成の鍵として小胞体およびゴルジ装置に位置しています。さらに、これらはリソソームでの触媒として機能し、膜や支持材料の一般的な成分である炭水化物構造を分解します。消化管では、グリコシダーゼは乳糖やデンプンなどの複雑な炭水化物を分解してエネルギーと栄養の摂取を促進します。多くの重要な機能のために、グリコシダーゼは多くの分野で有用とされています。これらは、望ましいグリコシル化修飾のためにタンパク質や抗体を処理するために使用されます。厳密な基質特異性は、糖タンパク質や多糖類の組成を特定し分析するために利用され、その情報は分子および生物学的医薬品の開発に使用されます。産業用途には、バイオマスの分解、パルプおよび紙の漂白、繊維ケア、複雑な炭水化物構造の合成が含まれます。配列の類似性に基づいて、グリコシダーゼは128のグリコシドヒドロラーゼファミリー（GH1からGH128）または三次構造に基づいて14のクランに分類できます。

DNAグリコシラーゼは、N-グリコシド結合の切断を触媒し、特に核酸のリボース-リン酸部分から窒素塩基を切り離します。これらは、主に小さな損傷を持つDNAを修復するための主要なメカニズムである塩基除去修復に大きく関与しています。一部のDNAグリコシラーゼは、グリコシラーゼ活性のみを発現し、したがって単機能DNAグリコシラーゼと呼ばれます。一方、他のグリコシラーゼは追加のアプーリニック/アピリミジニック（AP）リアーゼ活性を示し、二機能グリコシラーゼと呼ばれます。構造的類似性に基づいて、DNAグリコシラーゼは4つのスーパーファミリーに分類できます：UDG、AAG、MutM/Fpg、およびHhH-GPDファミリー。UDG（ウラシル-DNAグリコシラーゼ）ファミリーは、シトシンの一般的な脱アミノ化によって引き起こされるDNA損傷を修復する重要な機能のため、分子生物学で最も研究されています。DNAグリコシラーゼはDNA分子に直接作用するため、酵素の機能不全は癌に密接に関連しています。例えば、DNAグリコシラーゼのダウンレギュレーションは特定の癌の発生につながることがわかっています。しかし、この研究分野は比較的新しく、癌治療を直接指導するための情報はほとんど収集されていません。

グリコシラーゼに関する研究は過去数年間で急速に成長しましたが、特に酵素の信頼できる活性測定の特性評価は広く示されていません。まず、基質特異性のために、一部のグリコシラーゼの基質は準備が難しいです。また、ほとんどのグリコシラーゼの基質は特定の分光特性を持たない炭水化物であり、したがって分光分析には適していません。酵素学と炭水化物化学の専門家であるクリエイティブエンザイムズは、ほとんどのグリコシラーゼのための活性アッセイを確立し、開発しました。私たちは、市場でユニークな自然および合成基質を提供することができます。さらに、ラベル付けされた基質を使用した分光光度法アッセイや、クロマトグラフィーおよび蛍光分析を含む他の分析を通じた活性測定を実施することができます。私たちの酵素アッセイプラットフォームは、さまざまな反応マトリックスおよびさまざまな条件下で酵素活性を正確に測定することを可能にします。ただし、特定のテストプロトコルは、測定ごとに異なる場合があります。したがって、サービスリクエストを提出する際には、できるだけ多くの詳細を共有することを強くお勧めします。私たちの専門的な酵素学者チームは、あなたのニーズに基づいて最も適切なアッセイを設計します。

グリコシダーゼ（EC 3.2.1）はO-およびS-グリコシル基質を加水分解するグリコシラーゼです。

DNAグリコシラーゼ（EC 3.2.2）はN-グリコシル基を加水分解する酵素です。