ビリルビンオキシダーゼの酵素活性測定

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ビリルビンオキシダーゼ（EC 1.3.3.5; BOX）は、銅を含む酵素で、ヘムの分解産物であるビリルビンをビリベルジンに酸化する反応を触媒し、同時にO₂を水に還元します。この酵素はポルフィリンおよびクロロフィルの代謝に関与しています。この酵素は最初に子嚢菌植物病原体Myrothecium verrucariaから単離され、その後Bacillus pumilus、ラット、その他の生物でも見つかりました。ビリルビンオキシダーゼは、分子量60 kDaの単量体タンパク質であり、この酵素クラスの系統名はビリルビン:酸素オキシドレダクターゼで、ビリルビンオキシダーゼM-1とも呼ばれます。ビリルビンオキシダーゼは、多銅オキシダーゼファミリーの一員であり、1つのタイプI、1つのタイプII、2つの（1対の）タイプIII銅を含んでいます。タイプIIおよびIIIの銅は、酸素を水分子に還元する三核中心を形成し、タイプIの銅は基質から三核中心への電子媒介者として機能します。

ビリルビンオキシダーゼは、診断、バイオテクノロジー、医療、エネルギー生産産業において重要な酵素として機能します。ビリルビンはビリルビンオキシダーゼの基質であり、これは生理的なヘム分解の産物であり、胆汁の主要な色素であるテトラピロールから成ります。したがって、ビリルビンオキシダーゼは血清中のビリルビン濃度の診断測定に使用できます。さらに、ビリルビンオキシダーゼは中性pHでの高い反応性により、バイオ燃料電池のカソード反応において最も優れた酵素の1つであると報告されているため、低温バイオ燃料電池アプリケーションにおいても注目されています。

図：Myrothecium verrucariaからのビリルビンオキシダーゼの構造。
参考文献：水谷公彦他。Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun. 2010年7月1日; 66(Pt 7): 765-770。

ビリルビンオキシダーゼが実行する多くの機能にもかかわらず、この酵素の活性アッセイは複雑で困難であることがわかっています。おそらく、酵素の精製過程でNAD⁺、NADP⁺、FADおよびFMNが失われるためです。ここクリエイティブエンザイムズでは、十分な純度と量のホロタンパク質を準備し、440 nmでの吸光度を追跡することによってビリルビンオキシダーゼ活性の分光測定アッセイを実施することができます。クリエイティブエンザイムズは、優れた技術、専門知識、最先端の機器を備え、顧客の研究を優れた方法でサポートします。全体として、クリエイティブエンザイムズは常に信頼できるパートナーであり続けます。