G3m上の不動化エンドプロテイナーゼGlu-C

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番号

NATE-1764

説明

エンドプロテイナーゼGlu-Cは、グルタミン酸のカルボキシル末端（-Glu/-X; アンモニウム炭酸塩pH 7.8またはアンモニウムアセテートpH 4.0、バッファA）またはグルタミン酸およびアスパラギン酸のカルボキシル末端（-Glu/-Xおよび-Asp/-X; リン酸バッファpH 7.8、バッファB）でペプチドおよびエステル結合を特異的に加水分解します。
G3m: デキストランに固定化されたCRカラムあたり25 µg（22ユニット）のエンドプロテイナーゼGlu-C。
このCRカラムは、リン酸バッファ内でアプリケーションごとに少なくとも12 µgのチューブリンまたは5 µgのBSAを切断します。
Nr. 7 保存バッファ: 50 mM Tris/HCl、pH 7.5、5 mM EDTA。
Nr. 31 反応バッファ: 25 mM NH4-アセテート、pH 4.0（上記参照）
Nr. 32 洗浄バッファ: 25 mM NH4-アセテート、pH 4.0、1 M NaCl
Nr. 62 反応バッファ: 50 mM リン酸バッファ、pH 7.8（上記参照）
Nr. 63 洗浄バッファ: 50 mM リン酸バッファ、pH 7.8、1 M NaCl

ソース

黄色ブドウ球菌

酵素委員会番号

EC 3. 4. 21. 19

ストレージ

4 °C

同義語

EC 3. 4. 21. 19; スタフィロコッカス・アウレウス V8 プロテアーゼ; プロテアーゼ, スタフィロコッカス・アウレウス (エンドプロテイナーゼグル-C); グルタミルエンドペプチダーゼ; V8 プロテアーゼ, エンドプロテイナーゼグル-C; スタフィロコッカスセリンプロテイナーゼ

プロトコル

1. 配達されたバッファーを（各2 ml以上）無菌の二重蒸留水で希釈します。
1回のアプリケーションには以下が必要です。
1 mlの10x反応バッファーと9 mlの二重蒸留水
2 mlの5x洗浄バッファーと8 mlの二重蒸留水
1 mlの10x保存バッファーと9 mlの二重蒸留水
基質は反応バッファーに入れておく必要があります。
2. CRカラムを10 mlの反応バッファーで平衡化します。
10 mlの反応バッファーをシリンジに入れ、重力で反応バッファーをカラムの上部フィルターまで流します。バッファーの流れが非常に遅い場合は、シリンジで圧力をかけてください。
3. 反応バッファー中の基質溶液をロードします。
小さな体積（< 70 µl）：CRカラムをベンチトップ遠心分離機で5秒間回転させます（2000 rpmで十分です）。基質溶液がマトリックス材料に入るのを待ちます。
大きな体積：基質溶液をカラムを通して流します。
流量：最大70 µl/分
基質をカラム内に約1分間室温で保持します。基質を再度カラムに適用するか、長時間インキュベートすることで、より高い回転率が得られます。
4. 製品溶液を溶出します。
小さな体積（<70 µl）：カラムから製品を遠心分離します。
大きな体積：基質をカラムを通して流し、残留溶液をマトリックスから遠心分離します。
注意：700ダルトン未満の分子は7 mlの反応バッファーで溶出する必要があります。
カラムが乾燥しても害はありません。
5. カラムを10 mlの洗浄バッファーで洗浄します。
6. カラムを10 mlの保存バッファーで平衡化します。
カラムは4°Cで保管します。CRカラムを凍結しないでください！

酵素

カタログ	製品名	EC番号	CAS番号	ソース	価格
NATE-1763	F7m上の不動化エンドプロテイナーゼGlu-C	EC 3. 4. 21. 19		黄色ブドウ球菌	お問い合わせ
NATE-0730	ネイティブスタフィロコッカス・アウレウス V8 プロテアーゼ (エンドプロテイナーゼグル-C)	EC 3.4.21.19	137010-42-5	スタフィロコッカス・アウレウス V8	お問い合わせ
NATE-1270	スタフィロコッカス・アウレウス由来のエンドプロテイナーゼGluC、組換え型		66676-43-5	バチルス・サブチリス	お問い合わせ

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