F7m上の不動化エンドプロテイナーゼGlu-C

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番号

NATE-1763

説明

エンドプロテイナーゼGlu-Cは、グルタミン酸（-Glu/-X; アンモニウム炭酸塩pH 7.8またはアンモニウムアセテートpH 4.0、バッファA）のカルボキシル末端またはグルタミン酸とアスパラギン酸（-Glu/-Xおよび-Asp/-X; リン酸バッファpH 7.8、バッファB）でペプチドおよびエステル結合を特異的に加水分解します。
F7m: CRカラムあたり1.0 mgのエンドプロテイナーゼGlu-CがマトリックスF7mに固定化されています。CRカラムあたり900ユニットが固定化されています。
Nr. 7 保存バッファ: pH 7.5の50 mM Tris/HCl、5 mM EDTA。
Nr. 31 反応バッファA: 25 mMアンモニウムアセテート、pH 4.0（上記参照）
Nr. 32 洗浄バッファA: 25 mMアンモニウムアセテート、pH 4.0、1 M NaCl
Nr. 62 反応バッファB: 50 mMリン酸バッファ、pH 7.8（上記参照）
Nr. 63 洗浄バッファB: 50 mMリン酸バッファ、pH 7.8、1 M NaCl

ソース

黄色ブドウ球菌

酵素委員会番号

EC 3. 4. 21. 19

ストレージ

4 °C

同義語

EC 3. 4. 21. 19; スタフィロコッカス・アウレウス V8 プロテアーゼ; プロテアーゼ, スタフィロコッカス・アウレウス (エンドプロテイナーゼグル-C); グルタミルエンドペプチダーゼ; V8 プロテイナーゼ, エンドプロテイナーゼグル-C; スタフィロコッカスセリンプロテイナーゼ

プロトコル

1. 配達されたバッファーを（各2 ml以上）無菌の二重蒸留水で希釈します。
1回のアプリケーションには
0.25 mlの10x反応バッファーと2. 25 mlの二重蒸留水
0.4 mlの5x洗浄バッファーと1. 6 mlの二重蒸留水
0.2 mlの10x保存バッファーと1. 8 mlの二重蒸留水
基質は反応バッファーに入れておく必要があります。
2. CRカラムを2 mlの反応バッファーで平衡化します。
2 mlの反応バッファーをシリンジに入れ、重力で反応バッファーをカラムを通して上部フィルターまで流します。バッファーの流れが非常に遅い場合は、シリンジで圧力をかけてください。
3. 反応バッファー中の基質溶液をロードします。
小さな体積（< 80 µl）：CRカラムをベンチトップ遠心分離機で5秒間回転させます（2000 rpmで十分です）。基質溶液がマトリックス材料に入るのを待ちます。
大きな体積：基質溶液をカラムを通して流します。
流量：最大80 µl/分
基質をカラム内に約1分間室温で保持します。基質を再度カラムに適用するか、長時間インキュベートすることで、より高い回転率が得られます。
4. 製品溶液を溶出します。
小さな体積（< 80 µl）：500 µlの反応バッファーで製品を溶出します。
大きな体積：基質をカラムを通して流し、残りの製品溶液を500 µlの反応バッファーで溶出します。
カラムが乾燥しても問題ありません。
5. カラムを2 mlの洗浄バッファーで洗浄します。
6. カラムを2 mlの保存バッファーで平衡化します。
カラムを4°Cで保管します。 CRカラムを凍結させないでください！

酵素

カタログ	製品名	EC番号	CAS番号	ソース	価格
NATE-1764	G3m上の不動化エンドプロテイナーゼGlu-C	EC 3. 4. 21. 19		黄色ブドウ球菌	お問い合わせ
NATE-0730	ネイティブスタフィロコッカス・アウレウス V8 プロテアーゼ (エンドプロテイナーゼグル-C)	EC 3.4.21.19	137010-42-5	スタフィロコッカス・アウレウス V8	お問い合わせ
NATE-1270	スタフィロコッカス・アウレウス由来のエンドプロテイナーゼGluC、組換え型		66676-43-5	バチルス・サブチリス	お問い合わせ

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