エンドプロテイナーゼ Asp-N

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エンドペプチダーゼ

エンドペプチダーゼは主にタンパク質ポリペプチド鎖内のペプチド結合に作用し、長いタンパク質鎖を短いペプチド断片に分解します。このプロテアーゼが必要とする切断部位の特異性は、プロテアーゼの基質特異性と呼ばれます。プロテアーゼの基質特異性は、特定の構造を持つペプチドをターゲットにして得るために使用できます。

エンドペプチダーゼ

エンドプロテイナーゼAsp-Nは、アスパラギン酸のアミノ末端を特異的に加水分解するアスパラギン酸プロテアーゼで、プロテオミクス分析において有望な応用があります。エンドプロテイナーゼAsp-Nは亜鉛メタロエンドペプチダーゼです。非常に特異的で、アスパラギン酸残基のN末端側のペプチド結合を切断し、グルタミン酸（E）残基に対してはそれよりも少ない程度で切断します。これはPseudomonas fragiの変異株から得られ、分子量は27 kDaです。亜鉛の存在下で、pH 4–9の範囲で最適な活性を示し、変性条件下でも活性を維持できます。Asp-Nプロテアーゼは、トリプシンなどの他のプロテアーゼと組み合わせて使用することで、タンパク質の消化を改善できます。質量分析グレードのAsp-Nプロテアーゼは、ペプチドマッピング、タンパク質同定、溶液中およびゲル中でのタンパク質消化、ペプチド質量フィンガープリンティングに使用できます。製品情報については酵素ページを訪れてください。

出所

このAsp-Nは、Pseudomonas fragiの変異株から得られた質量分析（MS）グレードの亜鉛メタロプロテイナーゼで、活性には微量の亜鉛が必要です。Asp-Nは単独で使用することも、トリプシンや他のプロテアーゼと並行して使用することもでき、ペプチドマッピングやタンパク質配列決定のためのタンパク質消化物を生成します。Asp-Nプロテアーゼは、溶液中またはゲル中の消化ワークフローのいずれにも適しています。

特性

エンドプロテイナーゼAsp-Nは、主にアスパラギン酸残基およびシステイン残基の酸化によって生成されるシステイン酸残基のアミノ側で切断し、限られた数のペプチド断片を生成します。切断はグルタミン酸残基でも発生する可能性がありますが、グルタミン酸残基での切断速度はアスパラギン酸残基での切断速度よりも著しく低いです。AspNは37°Cで2-20時間の間に効率的にタンパク質を消化できます。AspNは、1M尿素、2Mグアニジン·HCl、0.1% SDS、2% CHAPS、10%アセトニトリルなどの変性条件下でも活性を維持し、pH 6-8の範囲で最適な活性を示します。この凍結乾燥酵素は27 kDaの質量を持ち、-20°Cで保存すると1年間安定です。