クリエイティブエンザイムズは、酵素活性測定において数年間にわたり最大の市場シェアを獲得しています。私たちは、研究に最適なサポートを提供するための包括的な専門知識と先進的な設備を持っています。プロフェッショナルなアッセイ手法と高品質なテストは、数千人の科学者のニーズを満たしてきました。メソッド開発とデータ分析における強力な存在感を持つクリエイティブエンザイムズは、迅速なターンオーバーで信頼性の高いカスタマイズサービスを提供できます。放射線酵素アッセイの需要が高まる中、クリエイティブエンザイムズは酵素活性と動力学の使用のために標準化された放射線アッセイサービスを確立しました。

過去10年間、放射線酵素アッセイの固有の感度、特異性、シンプルさは、これらの開発と応用の急速な増加をもたらしました。放射線酵素アッセイは、放射性基質を放射性生成物に変換することに基づいています。酵素触媒反応の速度は、反応混合物から分離した後の生成物または残留基質の放射能を測定することによって決定されます。基質と生成物の定量的分離のためのシンプルで迅速な方法の利用可能性は、放射線酵素アッセイの2つの主要な要件の1つです。もう1つの要件は、既知の特定の放射能を持つ適切な標識基質の利用可能性です。放射線酵素アッセイの基質は通常、低い特定活性で使用され、正確に簡単に測定できるため、標識基質と生成物の定量的分離が酵素テストのポイントです。クリエイティブエンザイムズは、迅速な抽出と分離に関する豊富な経験を持っており、正確な結果を保証します。

従来の色素法や分光光度法などの最も一般的な方法と比較して、放射線アッセイには多くの利点があります。まず第一に、これらの2つの方法とは異なり、放射線アッセイは、濃い色の粗抽出物などの反応溶媒の干渉を受けません。さらに、放射性生成物のみを測定することで、放射線アッセイは生成物の高濃度を含む抽出物中の酵素活性を測定することができます。加えて、放射線アッセイの感度により、基質濃度のより広い範囲で使用することが可能です。触媒化学反応の種類に基づいて、酵素は6つのクラスに分けられます。放射線活性アッセイは、すべてのクラスで利用できます。

• 酸化還元酵素

従来の分光法アッセイは、この酵素群に対してよく研究されています。なぜなら、ほとんどの酵素がNAD、NADP、FAD、FMNなどの補酵素を利用して大きなスペクトルシフトを引き起こすからです。しかし、感度が不十分で、汚染酵素や内因性物質からの干渉を避けるために、放射線法が代わりに使用されています。また、いくつかの反応は粗抽出物のみで研究されており、その補因子や水素供与体または受容体の要件はまだ知られていません。これらの状況では、放射線アッセイ法が唯一の可能性のようです。

• 転移酵素

これは大きな酵素クラスであり、放射線法はアッセイで広く使用されています。例えば、メチル基が¹⁴Cまたはトリチウムで標識されたS-アデノシルメチオニンは、放射線アッセイのメチル供与体として使用できます。アシル基を転移する酵素には、アシル標識されたアシル-CoAが基質として使用できます。

• 加水分解酵素

過去には、これらの酵素は主に生成された酸を推定することによって、pH滴定や重炭酸緩衝液からのCO₂放出を測定することによってアッセイされてきました。しかし、これらは従来のアッセイよりも迅速、シンプル、正確、かつ感度が高いため、多くの放射線アッセイが記述されています。

• 脱炭酸酵素

放射線アッセイは、脱炭酸酵素のアッセイに頻繁に使用されます。カルボキシル標識基質からの¹⁴CO₂の放出は、明白で最も一般的に使用される技術です。

• 異性化酵素

放射線法はこのクラスの酵素のアッセイに偶然にしか適用されていませんが、従来の技術よりもはるかに感度が高く、シンプルであることがわかっています。

• リガーゼ

放射線アッセイは、リガーゼ活性テストにしばしば使用されます。例えば、アミノ酸と特定の受容体転移リボ核酸からアミノアシル-tRNAのATP依存的形成を触媒するアミノアシル-tRNA合成酵素です。これらの酵素は非常に特異的であり、各酵素は自然なアミノ酸の1つにのみ特異的です。これらはほぼ独占的に放射線法によってアッセイされています。

図: 14C標識アセチル-CoAを基質として使用するコリンアセチルトランスフェラーゼによって触媒される反応、放射線アッセイの例。

特定の操作に関連するいくつかの課題にもかかわらず、放射線アッセイは多くの分野で重要なアプローチとなっています。これらの方法は、一般的な生化学だけでなく、特に遺伝的酵素欠損によって引き起こされる病気の研究と診断においてますます有用であることが予測されます。クリエイティブエンザイムズは、酵素サービス産業に対する鋭い洞察を常に持ち、先進的な技術と緊急の需要を密接に追跡しています。私たちの放射線酵素アッセイは、最高品質と迅速なターンアラウンドを誇ります。技術サポートやサービスに関するお問い合わせは、ぜひご連絡ください。

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