T4エンドヌクレアーゼV（T4 PDG）

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番号

TEVG-0001

説明

T4エンドヌクレアーゼVは、DNA N-グリコシラーゼ活性およびAPリアーゼ活性を有する二機能性DNA修復酵素である。本酵素は、DNA中の紫外線誘発性cis-syn型シクロブタンピリミジン二量体を認識する。

略語

T4 PDG

エイリアス

T4ピリミジンDNAグリコシラーゼ；T4エンドヌクレアーゼV

ソース

T4ファージ

種

T4ファージ

アプリケーション

DNA損傷試験；単一細胞ゲル電気泳動法（コメットアッセイ）。

パッケージ

500単位
1,000単位

製品概要

本酵素は、ピリミジンダイマーの5′側におけるグリコシド結合を切断してAP（アプリニック／アピリミジニック）部位を生成した後、当該部位でホスホジエステル骨格を切断し、1ヌクレオチド欠損（ギャップ）を形成する。

アクティビティ

1 U/µL

汚染物質

非特異的DNase：検出されず。
大腸菌宿主由来ゲノムDNA：＜0.05コピー/U。

分子量

16.1 kDa

純度

SDS-PAGEにより95％以上

集中

1 U/µL

特異性

UV照射により生成されるcis-syn型シクロブタンピリミジンダイマーを認識する。

ユニット定義

1ユニットは、UV照射したスーパーコイル状pUC19 DNA 0.5 µgを、37°Cで30分間、20 µL反応系において95%超のニック化プラスミドへ変換するのに必要な酵素量と定義する。ニック化の評価はアガロースゲル電気泳動により実施し、照射プラスミドには平均3～5個のピリミジンダイマーが含まれる。

ストレージ

-25℃～-15℃で保存してください。有効期間：1年。

機能

DNA N-グリコシラーゼ活性によりUV誘発性ピリミジン二量体を除去し、続いてAPリアーゼ活性により生成したAP（アプリニック／アピリミジニック）部位を切断する。

同義語

T4 PDG；T4 エンドヌクレアーゼV；ピリミジンダイマーグリコシラーゼ；T4 ピリミジンDNAグリコシラーゼ

基板

UV誘発性cis-syn型シクロブタンピリミジンダイマー（CPD）を含有するDNA。

反応

ピリミジン二量体DNA → AP部位DNA＋遊離ピリミジン二量体；AP部位DNA → ホスホジエステル骨格が切断された1ヌクレオチド欠損（ギャップ）DNA。

利点

Bifunctional DNA N-glycosylase/AP lyase activity; protein purity ≥95%; no detectable nonspecific DNase; low residual host genomic DNA.

コンポーネント

500 U package:
T4 Endonuclease V (T4 PDG), 1 U/µL: 500 µL
10× T4 Endonuclease V Reaction Buffer: 1 mL

1,000 U package:
T4 Endonuclease V (T4 PDG), 1 U/µL: 1 mL
10× T4 Endonuclease V Reaction Buffer: 2 mL

使い方

UV誘発性DNA損傷の酵素解析およびコメットアッセイのワークフロー向け。

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