G3m上の不動化RNase A

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番号

NATE-1773

説明

RNase AはRNAを切断するエンドヌクレアーゼであり、DNAは切断しません。RNase Aは、ピリミジンリボヌクレオチドを3'-隣接のリン酸ジエステル結合Py/pNで特異的に切断し、ヌクレオシド-2',3'-シクロホスフェートを中間生成物として形成します。
G3m: 25 µg (2.5 Kunitz単位) RNase Aをデキストランに固定化したCRカラムごとに
このG3mカラムは、アプリケーションごとに少なくとも200 µgのRNAを消化します。
Nr. 5 保存バッファ: 50 mM Tris/HCl, pH 7.5
Nr. 5 反応バッファ: 50 mM Tris/HCl, pH 7.5 (1% SDSでも活性)
Nr. 6 洗浄バッファ: 50 mM Tris/HCl, 1 M NaCl, pH 7.5
カラムは保存バッファに提供されています。

ソース

牛膵臓

酵素委員会番号

EC 3. 1. 27. 5

ストレージ

4 °C

同義語

膵臓リボヌクレアーゼ; EC 3. 1. 27. 5; RNase; RNase I; RNase A; 膵臓RNase; リボヌクレアーゼI; エンドリボヌクレアーゼI; リボ核酸ホスファターゼ; アルカリ性リボヌクレアーゼ; リボヌクレアーゼ; 遺伝子S糖タンパク質; Ceratitis capitataアルカリ性リボヌクレアーゼ; SLSG糖タンパク質; 遺伝子S座位特異的糖タンパク質; S-遺伝子型関連糖タンパク質; リボヌクレート3'-ピリミジンオリゴヌクレオチドヒドロラーゼ; 9001-99-4

プロトコル

1. 配送されたバッファーを（各2ml以上）無菌の二重蒸留水で希釈します。
1回のアプリケーションに必要なもの：
1 ml 10x 反応バッファーと9 ml 二重蒸留水
2 ml 5x 洗浄バッファーと8 ml 二重蒸留水
1 ml 10x 保存バッファーと9 ml 二重蒸留水
基質は反応バッファーに入れておく必要があります。
2. CRカラムを10 mlの反応バッファーで平衡化します。
10 mlの反応バッファーをシリンジに入れ、重力で反応バッファーをカラムを通して上部フィルターまで流します。バッファーの流れが非常に遅い場合は、シリンジで圧力をかけてください。
3. 反応バッファー中の基質溶液をロードします。
小さな体積（< 70 µl）：CRカラムをベンチトップ遠心分離機で5秒間回転させます（2000 rpmで十分です）。基質溶液がマトリックス材料に入るのを待ちます。
大きな体積：基質溶液をカラムを通して流します。
流量：最大70 µl/分
基質をカラム内に約1分間室温で保持します。基質を再度カラムに適用するか、長時間インキュベートすることで、より高い回転率が得られます。
4. 製品溶液を溶出します。
小さな体積（< 70 µl）：カラムから製品を遠心分離します。
大きな体積：基質をカラムを通して流し、残留溶液をマトリックスから遠心分離します。
注意：700ダルトン未満の分子は7 mlの反応バッファーで溶出する必要があります。
カラムが乾燥しても害はありません。
5. カラムを10 mlの洗浄バッファーで洗浄します。
6. カラムを10 mlの保存バッファーで平衡化します。カラムを4°Cで保管します。
CRカラムを凍結しないでください。

酵素

カタログ	製品名	EC番号	CAS番号	ソース	価格
NATE-1930	アスペルギルス・オリゼー由来リボヌクレアーゼT2、組換え	EC 3.1.27.1		ピキア・パストリス	お問い合わせ
NATE-1913	ラナ・ピピエンス由来リボヌクレアーゼ、組換え型			大腸菌	お問い合わせ
NATE-0655	ネイティブ牛リボヌクレアーゼA	EC 3.1.27.5	9001-99-4	牛膵臓	お問い合わせ
NATE-0656	ネイティブ牛リボヌクレアーゼB	EC 3.1.27.5	9001-99-4	牛膵臓	お問い合わせ

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