G3m上の不動化プロテナーゼK

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番号

NATE-1768

説明

プロテイナーゼKは、変性した（SDS中）および高分子量の天然タンパク質に対して強いプロテオリティック活性を持つ非特異的セリンプロテアーゼです。これは、N-置換された疎水性、脂肪族および芳香族アミノ酸のカルボキシル基の後で主にペプチド結合を切断します。
G3m: CRカラムごとにマトリックスG3mに固定化されたプロテイナーゼK 25 µg。
CRカラムごとに固定化された0.7 mAnson単位。
このCRカラムは、アプリケーションごとに少なくとも370 µgのBSAを切断します。
番号5 保存バッファー: 50 mM Tris/HCl, pH 7.5
番号16 反応バッファー: 50 mM Tris/HCl, 5 mM NaCl, pH 8.0
番号17 洗浄バッファー: 50 mM Tris/HCl, 1.0 M NaCl, pH 8.0
カラムは0.1% SDSおよび40°Cでより活性です。また、PBSバッファー（20 mM Na-リン酸、pH 7.6で150 mM NaCl）でも活性です。

ソース

トリティラキウム・アルブム

酵素委員会番号

EC 3. 4. 21. 64

純度

クロマトグラフィーで精製され、リボ核酸分解酵素およびデオキシリボ核酸分解酵素を含まない

ストレージ

4 °C

同義語

トリチラキウムアルカリプロテイナーゼ; トリチラキウムアルバムセリンプロテイナーゼ; プロテイナーゼK; トリチラキウムアルバムプロテイナーゼK; エンドペプチダーゼK; EC 3. 4. 21. 64; 39450-01-6

プロトコル

1. 配達されたバッファーを（各2 ml以上）無菌の二重蒸留水で希釈します。
1回のアプリケーションに必要なもの：
1 mlの10x反応バッファーと9 mlの二重蒸留水
2 mlの5x洗浄バッファーと8 mlの二重蒸留水
1 mlの10x保存バッファーと9 mlの二重蒸留水
基質は反応バッファーに入れておく必要があります。
2. CRカラムを10 mlの反応バッファーで平衡化します。
10 mlの反応バッファーをシリンジに入れ、重力で反応バッファーをカラムを通して上部フィルターまで流します。バッファーの流れが非常に遅い場合は、シリンジで圧力をかけてください。
3. 反応バッファー中の基質溶液をロードします。
小さな体積（< 70 µl）：CRカラムをベンチトップ遠心分離機で5秒間回転させます（2000 rpmで十分です）。基質溶液をマトリックス材料に入れます。
大きな体積：基質溶液をカラムを通して流します。
流量：最大70 µl/分
基質をカラム内に約1分間室温で保持します。基質を再度カラムに適用するか、長時間インキュベートすることで、より高い回転率が得られます。
4. 製品溶液を溶出します。
小さな体積（< 70 µl）：カラムから製品を遠心分離します。
大きな体積：基質をカラムを通して流し、残留溶液をマトリックスから遠心分離します。
注意：700ダルトン未満の分子は7 mlの反応バッファーで溶出する必要があります。
カラムが乾燥しても害はありません。
5. カラムを10 mlの洗浄バッファーで洗浄します。
6. カラムを10 mlの保存バッファーで平衡化します。
カラムは4°Cで保管します。 CRカラムを凍結しないでください！

酵素

カタログ	製品名	EC番号	CAS番号	ソース	価格
NATE-0637	ネイティブトリチラキウムアルバムリムバープロテイナーゼK	EC 3.4.21.64	39450-01-6	トリティラキウム・アルバム・リンバー	お問い合わせ
NATE-1240	トリチラキウム・アルバム・リンバー由来のプロテイナーゼK、組換え型		39450-01-6	ピキア・パストリス	お問い合わせ
NATE-0221	ネイティブトリチラキウムアルバムプロテイナーゼK	EC 3.4.21.64	39450-01-6	トリティラキウム・アルブム	お問い合わせ

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