G3m上の不動化アルカリフォスファターゼ

問い合わせ

番号

NATE-1774

説明

G3m: 24 μg (100単位) のデキストランに固定化されたホスファターゼ per CR-column。
Nr. 15 保存バッファー: 50 mM Tris/HCl, pH 8.0
Nr. 18 反応バッファー: 50 mM Tris/HCl, 0.1 mM ZnCl2, 1 mM MgCl2 pH 8.0
長い分子の場合は高温（37 °C から 50 °C）を使用してください。カラムをインキュベーターまたは予め温めたバッファーに入れてください。
Nr. 17 洗浄バッファー: 50 mM Tris/HCl, 1 M NaCl, pH 8.0

ソース

腸詰め

酵素委員会番号

EC 3. 1. 3. 1

ストレージ

4 °C

同義語

アルカリフォスファターゼ; ALP; ALKP; ALPase; アルクフォス; EC 3. 1. 3. 1; アルカリフォスホモノエステラーゼ; グリセロフォスファターゼ; フォスフォモノエステラーゼ

プロトコル

1. 配送されたバッファーを（各2 ml以上）無菌の二重蒸留水で希釈します。
1回のアプリケーションに必要なもの：
2 ml 5x 反応バッファーと8 ml 二重蒸留水
2 ml 5x 洗浄バッファーと8 ml 二重蒸留水
1 ml 10x 保存バッファーと9 ml 二重蒸留水
基質は反応バッファーに入れておく必要があります。
2. CRカラムを10 mlの反応バッファーで平衡化します。
10 mlの反応バッファーをシリンジに入れ、重力で反応バッファーをカラムを通して上部フィルターまで流します。バッファーの流れが非常に遅い場合は、シリンジで圧力をかけてください。
3. 反応バッファー中の基質溶液をロードします。
小さな体積（< 70 μl）：CRカラムをベンチトップ遠心分離機で5秒間回転させます（2000 rpmで十分です）。
基質溶液がマトリックス材料に入るのを待ちます。
大きな体積：基質溶液をカラムを通して流します。
流量：最大70 μl/分
基質をカラム内に約1分間室温で保持します。基質を再度カラムに適用するか、長時間インキュベートすることで、より高い回転率が得られます。
4. 製品溶液を溶出します。
小さな体積（< 70 μl）：カラムから製品を遠心分離します。
大きな体積：基質をカラムを通して流し、残留溶液をマトリックスから遠心分離します。
注意：700ダルトン未満の分子は7 mlの反応バッファーで溶出する必要があります。
カラムが乾燥しても害はありません。
5. カラムを10 mlの洗浄バッファーで洗浄します。
6. カラムを10 mlの保存バッファーで平衡化します。
カラムを4 °Cで保管します。
CRカラムを凍結しないでください！

酵素

カタログ	製品名	EC番号	CAS番号	ソース	価格
NATE-1871	ネイティブ牛アルカリフォスファターゼ	EC 3.1.3.1	9001-78-9	牛肝	お問い合わせ
NATE-1664	ヒト由来アルカリフォスファターゼ（胎盤）、組換え	EC 3.1.3.1		バキュロウイルス	お問い合わせ
NATE-1634	マウス由来アルカリフォスファターゼ、組換え型	EC 3.1.3.1		昆虫細胞（バキュロウイルス）で、C末端にHisタグが融合されています。	お問い合わせ
NATE-0061	牛由来アルカリフォスファターゼ、組換え	EC 3.1.3.1	9001-78-9	ピキア・パストリス	お問い合わせ

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