レバンスクラースの酵素活性測定

クリエイティブエンザイムズは、酵素とその活性測定を専門とする産業バイオテクノロジー企業です。私たちは、多様でユニークな顧客と提携し、プロセス最適化のニーズをサポートします。クリエイティブエンザイムズの能力は広範で、酵素アッセイの発見、開発、最適化のすべての側面をカバーしています。クリエイティブエンザイムズは、レバンスクラースの最も信頼性の高い活性アッセイを提供する能力があります。

レバンスクラース（EC 2.4.1.10）は、Pantoea agglomerans、Zymomonas mobilis、Gluconobacter oxydans、およびRhanella aquatilisの分離株など、いくつかのグラム陰性種で特定されています。また、Bacillus subtilis、Streptococcus mutans、およびActinomyces viscosusなどのグラム陽性細菌でも見られます。この酵素は、次の三つの特性反応を触媒します：（i）フルクトシル化によるスクロースからレバンの合成、グルコースを放出しながら、（ii）レバンの加水分解によるフルクトースの単糖への変換、（iii）反応における[¹⁴C]グルコースの交換：フルクトース-2,1-グルコース + [¹⁴C]グルコース → フルクトース-2,1-[¹⁴C]グルコース + グルコース。レバンスクラースはβ(2,6)-結合を介してフルクトシルユニットを結合しますが、関連する酵素であるイヌロスクラース（EC 2.4.1.9）はβ(2,1)-結合を介して結合します。結合の種類に応じて、フルクタンポリマーはレバンまたはイヌリンと呼ばれます。これらの酵素はグリコシダーゼ（GH）のメンバーであり、細菌の酵素はファミリー68に分類され、構造的に関連する植物および真菌の酵素はファミリー32に分類されます。異なる細菌からのレバンスクラースの興味深い側面は、フルクトオリゴ糖（FOS）または高分子量ポリマーの形成における特異性です。一般的に、グラム陽性細菌からのレバンスクラースはポリマーを生成し、グラム陰性細菌からのものはFOSを生成します。

レバンスクラースは、食品および製薬産業でのレバン生産に役立ちます。たとえば、レバンは歯周病の病因において重要である可能性があります。なぜなら、レバンはプラーク内の重要な構造多糖であり、口腔微生物の成長のための炭水化物の貯蔵庫を提供するからです。さらに、レバンは免疫学的損傷を引き起こす可能性があり、他の生物からのレバンはヒトBリンパ球に対してミトジェニックであり、代替経路によって補体を活性化することが示されています。加えて、レバンスクラースは人工甘味料やラクトスクロースの生産にも使用できます。したがって、レバンスクラースの機能的意義を成功裏に調査するためには、この酵素の活性を監視できることが重要です。しかし、これまでに説明されたレバンスクラースは、分子量、ドナー、アクセプター、および阻害剤の特異性などの特性において大きく異なり、産業規模での酵素アッセイを円滑に行う上での障害となっています。幸いなことに、クリエイティブエンザイムズは、酵素の発見と方法の最適化に関する長年の経験に基づいて、レバンスクラースの正確な活性アッセイを提供しています。

分光光度法によるレバンスクラースアッセイは、スクロースとのインキュベーション中に放出されるグルコースの量を測定する紫外線グルコースアッセイキットに基づいています。サンプル中のグルコースの量は、生成された還元型NADPHの量に比例します。このアッセイキットをレバンスクラースの連続分光光度法アッセイに変換するために、スクロースが追加され、340 nmでの吸光度が分光光度計によって記録されます。課題に関係なく、クリエイティブエンザイムズは常に次の開発段階の要件を満たし、満足のいくサービスであなたの最良の選択となります。私たちの製品の最高品質基準は、私たちのグローバルな成功の柱の一つであり、高い顧客満足度の基盤です。

図： Bacillus subtilis レバンスクラースの結晶構造。
PDB: 1OYG