シトクロムを受容体とするCH-OH基に作用する酸化還元酵素の酵素活性測定

クリエイティブエンザイムズは、酸化還元酵素の酵素活性測定におけるリーディング組織です。特に、シトクロムを補因子として使用するCH-OH基に作用する酸化還元酵素の活性を測定できる企業は非常に少なく、技術的な課題があります。私たちの最も経験豊富な専門チームと最新の分析スペクトロメーターを組み合わせることで、酵素活性の非常に信頼性の高い結果を得ることができます。

EC 1.1.2のカテゴリに属する酸化還元酵素は、主にアルコールに作用するCH-OH基に作用する酵素のファミリーであり、シトクロムをレドックス補因子として使用します。これらの酵素は、アルコールの酸化を触媒し、シトクロムを電子受容体として使用して対応するアルデヒドを生成します。シトクロムは、約12 kDaのサイズの高度に保存されたタンパク質のファミリーです。これらのタンパク質は一般的に約100個のアミノ酸とヘム基からなる単一のペプチドで構成されています。シトクロムは、共有結合を通じてヘムを補助基として使用します。ほとんどのヘムタンパク質は鉄配位を介して補助基に結合していますが、シトクロムcは、タンパク質の2つのシステイン側鎖を介してヘム基とチオエーテル結合を形成します。ヘムの重要な特徴は、異なる還元電位を持つ能力であり、これによりさまざまな酸化状態と状態間の容易な変換が可能になります。自然界において、シトクロムcはさまざまな機能を持っていますが、主にヘム基の特性により電子運搬タンパク質として知られています。細胞内での二価鉄（鉄（II）、還元型）と三価鉄（鉄（III）、酸化型）間のシトクロムの遷移は、効率的な生物学的電子輸送体としての役割を果たします。したがって、シトクロムは植物と動物の細胞酸化において重要な役割を果たします。呼吸の普遍的な触媒と見なされ、呼吸可能な基質と酸素の間に重要な電子ブリッジを形成します。さらに、ヘムを補助基として使用することで、シトクロムは鉄の酸化状態を通じて電子移動反応の動力学と熱力学を容易に決定することができます。これらすべてにより、補因子シトクロムは酸化還元酵素EC 1.1.2によって触媒される酵素反応の理想的な報告剤となります。アルコールの還元反応が進行するにつれて、シトクロムは同時に酸化され、550 nmで強い吸収を得ます。

クリエイティブエンザイムズでは、この波長を使用して酵素活性を測定することの少なくとも2つの利点を見出しました。第一に、この波長は可視光の範囲にあり、ほとんどの溶媒や小さな有機分子のUV/vis吸収から遠く離れているため、クリーンな信号と干渉の少なさを実現します。さらに、シトクロムの酸化または還元を監視することで、ヘモグロビンなどの他のタンパク質からの干渉も減少します。これは、活性アッセイが組織抽出物のような混合物のサンプルで実施される必要がある場合に特に重要です。

図：ホモ・サピエンス（人間）からの補因子シトクロムcの構造。タンパク質は緑色で示されています。補助基ヘムcはベージュで示されています。鉄原子は赤色です。PDB: 3NWV

クリエイティブエンザイムズは、シトクロムを補因子として使用するすべての酸化還元酵素の活性を正確に測定するために、比色アッセイを使用しています：

• EC 1.1.2.2: マンニトール脱水素酵素
• EC 1.1.2.3: L-乳酸脱水素酵素
• EC 1.1.2.4: D-乳酸脱水素酵素
• EC 1.1.2.5: D-乳酸脱水素酵素
• EC 1.1.2.6: ポリビニルアルコール脱水素酵素
• EC 1.1.2.7: メタノール脱水素酵素
• EC 1.1.2.8: アルコール脱水素酵素
• EC 1.1.2.1は古い番号で、現在はEC 1.1.99.5になります

私たちの優れたテスト品質は、多くの顧客からの成功の物語によって示されています。あなたのビジネスがこれらの繊細な酵素のいずれかのテストを含む場合、クリエイティブエンザイムズはあなたの最も信頼できるパートナーです。