NRBPは、C. elegans、黒色線虫、マウスおよびヒトにおいて相同性を持つ、進化的に保存された新しいファミリーのタンパク質を表します。COS-1細胞におけるNRBPの過剰発現は、JNK経路、p38経路、またはアクチン細胞骨格の再構成を含むRac3の下流標的の活性化には至りませんでした。さらに、NRBPはアクチンベースのストレスファイバーや微小突起、皮質下アクチンと共局在しませんでした。しかし、NRBPの過剰発現により、多数のゴルジ体関連マーカーp58が細胞内のより周辺部へ再分布し、小胞体からゴルジ体への輸送障害と一致する現象が観察されました。免疫細胞化学により、NRBPと活性化Rac3が子宮内膜および細胞のラメリポディア周辺部で共局在していることが示されました。これらの結果は、NRBPが細胞内輸送に関与し、Rhoファミリーの小型GTPaseと相互作用することで特定の細胞内局在に標的化される可能性があることを示唆しています。

序論

細胞内のシグナル伝達経路は、さまざまなタンパク質によって制御されています。アダプタータンパク質の一種は、この制御過程で重要な役割を果たします。これらは特定のドメインやアミノ酸配列／モチーフを利用して、シグナルタンパク質同士、またはシグナルタンパク質と脂質分子間の結合を特異的に調節し、上流と下流のシグナル伝達経路をつなぐ役割を果たします。接続と調節において重要な役割を担っています。新たに発見されたタンパク質であるNRBP（nuclear receptor binding protein：核内受容体結合タンパク質）は、ほとんどの正常なヒト組織で発現が認められ、胸腺で最も低く、精巣および胎盤で最も高い発現を示します。NRBPは293細胞やHeLa細胞を含む15種類のヒト腫瘍細胞株でも発見されています。NRBPタンパク質は535個のアミノ酸から構成され、進化的に保存されており、複数の機能ドメインを含みます。グルタミン酸とセリンに富むN末端配列は、NRBPと他のSH2ドメイン含有タンパク質との結合を媒介する可能性があります。同時に、NRBPは2つの核内受容体結合ドメイン、核内移行シグナル（NLS: nuclear localization signal）、および核外移行シグナル（NES）を持つ核内受容体結合タンパク質である可能性も示唆されています。現在、NRBPの機能に関する研究はあまり進んでいませんが、Rac3、Mlf1、NS3、Jab1などのタンパク質と結合し、関連機能を調節できることが報告されています。市販の抗NRBP抗体が存在しないため、遺伝子工学的手法により大腸菌発現系でNRBP融合タンパク質を作製し、ヒトNRBP特異的ポリクローナル抗体を作製・精製しました。アダプタータンパク質NRBPの機能をさらに研究するための基礎を築きました。

NRBPと疾患

がんや自己免疫疾患など多くのヒト疾患は、シグナル伝達経路と密接に関連しています。細胞内シグナル伝達系は、細胞増殖、神経活動、発生と分化、代謝、筋収縮など、生命活動のすべての過程を制御できます。リンカータンパク質は複数のシグナル経路に関与し、シグナル伝達過程において代替不可能な重要なタンパク質です。これらの研究は、より複雑な細胞シグナル経路の理解を深め、シグナル経路関連の創薬ターゲット開発に必要な情報を提供します。ヒトNRBP遺伝子は染色体2p23領域に位置し、このバンドまたは隣接バンドの転座は腫瘍や造血障害と密接に関連しています。2002年、De Langheらは、NRBPがRhoファミリーのRac3と結合し、過剰発現したNRBPが小胞体からゴルジ体へのゴルジマーカータンパク質p58の輸送を阻害できることを発見しました。マウスMADMとヒトNRBPのアミノ酸配列の相同性は98%にも達します。NRBPは骨髄性白血病因子Mlf1と相互作用し、セリンキナーゼをリクルートしてMlf1をリン酸化し、Mlf1と重要なタンパク質14-3-3ζの結合を開始することが判明しています。単球でM1期に過剰発現したMADMは、Mlf1の細胞内分布を調節することでサイトカイン誘導性細胞分化を制御できます。同時に、我々の先行研究では、NRBPが転写活性化因子Jab1を介してTCR経路下流で重要な負の調節的役割を果たす可能性が示唆されました。NRBPの過剰発現は、Jurkat T細胞においてTCRまたはPMA誘導性転写因子NFATおよびAP-1の活性を有意に抑制できます。

参考文献

1. Hooper JD; 他。ヒトNRBPをコードする遺伝子のcDNAのクローニングおよび局在化、ユビキタスに発現する多ドメイン型推定アダプタータンパク質。 Genomics. 2000年、66巻(1): 113-8。